BCA蛋白定量试剂盒产品使用说明书.pdf

Datasheet 爱必信（上海）生物科技有限公司 BCA 蛋白定量试剂盒 货号：abs9232 描述： BCA 法是理想的蛋白质定量方法，在碱性环境下蛋白质分子中肽键结构与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+ 。BCA 特异地与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562nm 处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，颜色的深 浅与蛋白质的含量成正比，可以根据吸收值测定蛋白质浓度。该测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成 的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质去垢剂等影响小。 产品特点： 1、准确灵敏，线性范围广，BCA 试剂的蛋白质测定范围是20~2000ug/mL； 2、快速：45min 内完成测定，比经典的Lowry 法快4 倍而且更加方便； 3、不受样品中离子型和非离子型去污剂影响； 4 、检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝,可以酶标板法或分光光度计法测定蛋白质浓度。 保存方法：BCA 蛋白定量试剂盒A 、B 应保存于2~8℃；5mg/mL BSA 应保存于-20℃。 试剂盒组分： 品名 500 次 2500 次 BCA 蛋白定量A 液 100mL 100mL×5 BCA 蛋白定量B 液 4mL 10mL×2 5mg/mL BSA 1mL 1mL×5 实验流程： 1、BSA 标准品的稀释 （1）BSA 应用相应的溶液稀释，最好与样本的稀释液一致。通常情况下，为了方便，可用蒸馏水稀释。 2 ）请按照下表来配置不同浓度的标准品，，得到的各点的浓度分别为： （ 20,125,250,500,750,1000,1500,2000ug/mLBSA，然后每孔加20ul，做两重复，待测。建议每种浓度做2~3 个复孔。 标准品浓度 BSA （5mg/ml ） 稀释液 （H O ） 2 2000 ug/ml 20ul 30ul 1500 ug/ml 15ul 35ul 1000 ug/ml 10ul 40ul 750 ug/ml 7.5ul 42.5ul 500 ug/ml 5ul 45ul 250 ug/ml 4ul 76ul 125 ug/ml 30ul of 250 ug/ml 稀释液 30ul 20 ug/ml 8ul of 125 ug/ml 稀释液 42ul _________________________________________________________________________________________________________________ 02128 email: info@ QQ: 800835708 Datasheet 爱必信（上海）生物科技有限公司 2、BCA 工作液的准备 （1）按下列公式计算所需要的BCA 工作液体积；（标准曲线+未知样品个数）×(重复次数) ×(每个样品所需的BCA 工作液体积)=所需要 BCA 工作液的总体积 例如：需要测定标准曲线和 3 个样品的蛋白浓度，每个实验重复 2 次，每次实验需要 200uL 工作液：(5 个标准 曲线点+3 个样品) ×(2 次重复) ×(0.2mL)=3.2mL 工作液 （2 ）将50 份A 液与1 份B 液混合后得到工作液。 注意：