液相色谱条件的分析和建立.ppt

液相色谱条件的分析和建立主讲人 :李效宽日期 : 2010年11月地点：武汉;合适的流动相; HPLC分离原理;不同类型样品的方法选择;色谱柱的选择;1.填料基质：硅胶、氧化铝、聚苯乙烯等 2. 键合相： C4、C8、C18、苯基、氨基、氰基等 3.孔径：60-100A 分子量2000 300A 分子量2000 4.粒径：2um-10um 5.内径：10mm以下（分析）， 10mm以上（制备） 6.长度：100、150、250、300mm;色谱柱填料选择;色谱柱选择; 流动相选择;甲醇和乙腈的紫外吸收图;不同混??溶剂的粘度比较;分离度（R1.5）和峰型（1.05T0.95）;可接受的分离条件K;理论塔板数;分离度;分离度与k（容量因子）的关系;分离度80%-70%-60%;分离度（48%-47%-46%);更换有机相;总结;其他控制选择性的因素;流动相pH值;流动相pH值;流动相pH值;pH值的影响(pka);pH值的影响;方式不同柱效不同;柱温的影响;更换色谱柱的影响;更换色谱柱的影响;流速的影响;填料及外型影响; a 150mm P=1800psi b 250mm P=3000psi;改变粒度，长度，流速;缓冲盐（离子强度调节）的影响;检测器的影响;检测波长的影响;1.等度条件;色谱条件开发的目标;等度洗脱的特点;梯度洗脱的特点;等度和梯度获得柱效不同;等度和梯度获得柱效不同;艰难的选择;快速寻找方法的起点;确定梯度运行的方法;一个实例;由梯度变换为等度;等度（79%)运行结果（考虑K?）;由梯度变换梯度(K?);第二次梯度运行结果;液相色谱的方法开发;梯度的洗脱方式;梯度一般方法;梯度洗脱的可变参数;如不用梯度：分离不理想;梯度条件的优化;梯度曲线的变化∶凹线;梯度曲线的变化∶凸线;梯度方法开发实例 - 第一步;梯度方法开发实例 - 第二步;梯度方法开发实例 - 第三步;梯度方法开发实例 - 第四步;梯度方法开发实例 - 第五步;梯度方法开发实例 - 第六步;梯度方法开发实例 - 第七步;三.实际应用案例;色谱应用实例[欣弗事件];色谱应用实例[欣弗事件];色谱应用实例【三聚氰胺(牛奶事件)];色谱应用实例（紫杉醇 注射液）;色谱应用实例（紫杉醇 注射液）;色谱应用实例（血塞通崩解片）;色谱应用实例（胆酸钠原料）;色谱应用实例（抗生素）;色谱应用实例（酒石酸长春瑞滨原料）;色谱应用实例（酒石酸长春瑞滨原料）;色谱应用实例（酒石酸长春瑞滨原料）;色谱应用实例（酒石酸长春瑞滨原料）;色谱应用实例（多糖）;有机碳;色谱应用实例（维生素）;有机酸;Thank You!!