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细胞工程考研大题 细胞工程考研问答题 细胞工程的地位 ,内容与技术 从某种意义上来说 ,基因工程就是现在生物技术的核心 ,而细胞工程则就是它的基础与公共平台 ,基因工程与 细胞工程的结合决定着生物技术的发展。按照生物类型可以分为 :动物细胞工程 ,植物细胞工程 ,微生物细胞 工程 ,按照操作对象可以分为细胞与植物培养 ,细胞融合 ,细胞核移植 ,染色体操作 ,转基因生物等 , 常用的化学消毒方法有哪些？ 化学方法 : 常用的就是 75%的酒精及 1%的新吉尔灭 , 甲醛 , 环氧乙烷 , 氯已定 , 戊二醛 , 过氧乙酸等。物理灭菌 法 : 紫外线 , 电离辐射 , 湿热 , 干热 , 过滤除菌等 常用培养技术 细胞培养的基本方法 :悬滴培养 ,培养瓶培养 ,旋转管培养。常用的培养技术 :克隆培养法。二倍体培养 ,同步化 培养及大规模培养。 体培养细胞有哪些类型？其生长有什么区别？ 1贴壁型细胞 1 成纤维型细胞 : 细胞贴壁后呈长梭形 , 圆形细胞核位于中央 , 生长呈放射状 , 旋涡状走向。 细胞之间排列疏散 , 有较大的细胞间隙。 2 上皮型细胞 : 细胞贴壁后呈三角形及不规则扁平的多角形 , 中央有 扁圆形核 , 细胞彼次紧密连接。 3 游走型细胞 : 细胞在支持物上分散生长 , 一般不连接成片形成菌落 , 呈活跃 的游走与变形运动 , 速度快且方向不固定 , 外形不规则且不断变化。 4 多形型细胞 : 形态上不规则 , 一般分胞 体与胞突两部分 , 其中胞突为细长型 , 类似丝状伪足 , 胞体呈现多角形。 2悬浮型细胞 : 某些细胞体外培养不 需要贴附支持物上而生存空间大 , 能大量繁殖细胞 , 容易进行传代培养。 细胞系的生长过程包括哪些？每一个生长阶段有什么特征？ (1) 原代培养期 : 也称初代培养 , 就是指从体内取出组织接种培养到第一代的阶段 , 一般持续 1～4 周。此期细 胞移动比较的活跃 , 可见细胞分裂 , 但就是不旺盛。 (2) 传代期 : 原代细胞生长一定时间后 , 如就是贴附型细胞 就会连接成片而铺满瓶底 , 这时需要将原代细胞分开至多个培养瓶中。细胞增殖旺盛 , 并维持二倍体核型。 (3) 衰退期 : 此期细胞仍生存 , 但就是不增殖或者增殖很慢 , 最后衰退死亡。 每代细胞的生长曲线包括那几个主要时期？各期细胞有何特点？ (1) 潜伏期 : 此时细胞已存活具有代谢及运动功能 , 但就是尚未增殖 (2) 指数生长期 : 又称对数期 , 此期细胞增 殖旺盛 , 成倍增长 , 活力最佳 , 适用于进行实验研究。 (3) 停止期 , 又称平台期 , 此期细胞几经将其支持物表面 沾满 , 细胞活力减退 , 已不再进行分裂增殖。 体外培养的细胞应满足哪些营养成分？ 1. 水 : 所需化学成分 , 生存环境 , 营养物质都必须用水溶解才能吸收 , 代谢产物溶于水才能排除 , 维持细胞形 态 , 调节渗透压 , 平衡 pH。2、平衡盐溶液 : 组织细胞培养中常用的基本液体 , 维持渗透压 , 调节 pH, 供给细胞 生存所需的能量与无机离子成分。 3、消化液 : 进行原代培养时组织的取材 , 传代拍样中贴壁细胞的分离 , 都 要使用消化液。 4 、消化酶抑制液 : 无血清培养时必须使用消化酶抑制液 , 以保护细胞免受残留的消化酶的过 度消化而损坏。 5 、pH 调整液 : 常用的有 NaHCO3溶液与 HEPES溶液。 6、抗生素液 : 预防由于操作不慎而产 生的微生物污染。 7、谷氨酰胺补充液 : 细胞代谢过程中有重要作用 , 合成培养基中都要添加 培养基的基本要求 营养成分 ( 氨基