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(完好版)冻干多肽的溶解的方法 (完好版)冻干多肽的溶解的方法 (完好版)冻干多肽的溶解的方法 冻干多肽的溶解 多肽溶解中的主要问题是二级构造的形成。 固然疏水肽链二级构造的形成更显然，但除了最短的肽链外，该现象发生在几乎全部肽链， 与极性没关。 所以， 溶解多肽的第一个原则是用无菌的蒸馏水或去离子水 （假如条件同意则用无氧水）。 多肽溶液可能碰到细菌降解。为防止该现象的发生，多肽应溶解在无菌的蒸馏水中，或许 用 0.45 或 0.2 μm孔径的滤膜过滤除菌。包括 Cys 、 Met 、 Trp 的多肽特别简单氧化，所以应当溶于无氧的水中。无氧水能够经过注入惰性气体（氮、氦、氩）减压除气获得。 若多肽不溶于纯水，超声办理有助于打坏颗粒并增添溶解度。注意：超声办理睬惹起溶液发热和多肽降解。 若多肽中包括多个碱性氨基酸，使用 1~10% 的乙酸水溶液；关于疏水性特别强的多肽，则使用 50% 乙酸。 若多肽中含有大批酸性氨基酸，可用 1~10% 氨溶液或乙酸乙基吗啡或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。 pH 值在层析前一定调整。 若肽要上柱，有机溶剂的量则一定极少，不然将严重影响滞留时间。 若多肽由于含有 Val 、 Leu 、 Met 、 Phe 、 Tyr 、 Ala 等芳烃侧链而高度疏水，或为中性肽时， DMF 或 DMSO 等膜变性剂的使用，有助于多肽的溶解。 高浓度膜变性剂经过损坏多肽的二级构造而助溶。 膜变性剂适于多肽剖析液的制备，但可能会对其生物活性的研究工作造成扰乱。 c . DMF 是最正确变性剂（最高浓度可达 30% ），滴加至多肽溶解。 d. 反相层析时， DMF 将与洗脱液前峰一同流出，依进样量的多少，峰值可能很高。大部分肽能在大批 DMF 流出后几分钟内流出，若肽链很小，洗脱太早，多肽的量将降低。