人类免疫缺陷病毒抗原抗体（HIV）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）.pdfVIP

人类免疫缺陷病毒抗原抗体（HIV ）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 使用说明书 【产品名称】 通用名称：人类免疫缺陷病毒抗原抗体（HIV ）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 英文名称：Antigen and Antibodies to Human Immunodeficiency Virus （CLIA ） 【包装规格】 100 人份/盒（2×50 人份/盒）、200 人份/盒（2×100 人份/盒）。 【预期用途】 本产品用于体外定性检测人血清样本中的人类免疫缺陷病毒 p2 抗原和人类免疫缺陷病毒 1 型和 2 型抗体。 人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV ），即获得性免疫缺陷综合征（AIDS ）的病原体，属 于逆转录病毒科，慢病毒属，灵长类免疫缺陷亚属。HIV 的传播途径主要包括血液和受污染的血制品、性接触和 孕前、孕期和孕后的母婴传播。 目前发现有两种人类免疫缺陷病毒1,2，即HIV1 型和 HIV2 型，它们又有各自的亚型。不同地区流行的亚型 不同，同一亚型在不同地区也存在一定差异。HIV1 主要可分成 3 种关系较远的组别：M 组（主要组）、O 组(外 围组)和N 组（非 M 非 O 组）35 。其中，HIV1 M 组中至少有 9 种不同的亚型（A, B, C, D, F, G, H, J 和 K ）和流 行重组形式（CRFs ），是全球广泛传播的病毒组3 。HIV1 O 组和 HIV1 N 组发现于喀麦隆，比较罕见，主要存在 于非洲中西部地区，但 HIV1 O 组病毒已在其他地方发现 4,5 。HIV2 可分为 8 种不同亚型（A H ），其中A 和 B 6 型是流行性亚型 。 当发生 HIV 感染时，人体的免疫系统会对 HIV 病毒的多种蛋白产生相应的抗体。其中包膜蛋白的免疫源性 最强，通常感染后最早产生抗体，且在整个疾病阶段始终保持，因此 HIV 感染的抗体检测通常以抗 HIV 包膜蛋 白抗体为检测目标 79 。由于 HIV1 和 HIV2 的包膜蛋白与诱导产生的抗体相互之间很少有交叉反应，因此需要 HIV1 和 HIV2 特异性抗原以确保免疫分析法能够成功检测 HIV 感染 10,11 。另外，第四代HIV 检测试剂盒除了检 测抗体外，通过测定近期感染患者（血清转换前）血清或血浆标本中的 HIV p2 抗原，能提早发现 HIV 感染 12,13 。 本试剂盒为第四代 HIV 检测试剂盒，可以在一次测试中同时检测出 HIV1 （包括O 组）病毒抗体，HIV2 病 毒抗体和 HIV p2 抗原，与只检测 HIV 抗体的第三代试剂盒相比，缩短了窗口期，提高了早期检出率。 【检验原理】 人类免疫缺陷病毒（HIV ）抗原抗体测定采用两步夹心化学发光免疫分析法，其检测原理如下： 第一步：将样本、样本处理液与包被着小鼠 HIV p2 单克隆抗体，HIV1/2 特异性抗原的超顺磁性微粒添加 到反应管中，经过孵育，样本中的 HIV p2 抗原和 HIV 抗体与磁珠上的小鼠 HIV p2 单克隆抗体、HIV1/2 特异 性抗原结合。孵育完成后，结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸住，而其他未结合的物质被冲洗除去。 第二步：将测试稀释液和 HIV p2 单克隆抗体碱性磷酸酶标记物、HIV1/2 特异性抗原碱性磷酸酶标记物 添加到反应管；经过孵育，碱性磷酸酶标记物上的 HIV p2 单克隆抗体、HIV1/2 特异性抗原与磁珠上被捕获的 HIV p2 抗原、HIV 抗体结合形成夹心复合物。在反应管内孵育完成后，该复合物被一个磁场吸住，而其他未结 合的物质被冲洗除去。 第三步：将化学发光底物添加到反应管内，发光底物（3(2螺旋金刚烷)4 甲氧基4(3磷氧酰)苯基1,2二氧 环乙烷，AMPPD ）被碱性磷酸酶所分解，脱去一个磷酸基，生成不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子 转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态至基态时，产生化学发光。再通 过光电倍增管对反应所产生的光子数进行测量。所产生的光子数与样本内 HIV p2