大肠杆菌噬菌体的分离纯化及效价的测定宣贯.pdfVIP

噬菌体的分离纯化及效价的测定 1 目的 1.1 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。 1.2 学会检查噬菌体的方法。 1.3 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。 2 原理 噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒， 其个体形态极其微小， 用常规 微生物计数法无法测得其数量。 当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解， 释放出 大量子代噬菌体， 然后它们再扩散和侵染周围细胞， 最终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变 清，或在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的空斑──噬菌斑。 了解噬菌体的特性， 快速 检查、分离，并进行效价测定，对在生产和科研工作中防止噬菌体的污染具有重要作用。 检样可以是发酵液、空气、污水、土壤等（至于无法采样而需检查的对象，可以用无菌 水浸湿的棉花涂拭表面作为检查样品） 。为了易于分离可先经增殖培养，使样品中的噬菌体 数量增加。 采用生物测定法进行噬菌体检查， 约需 12h