基因分型检测试剂盒常见问题.pptVIP

移液器： ①严禁大力来回拧动； ②严禁调至容量之外使用； ③第二档为排空档，不得作吸取之用； ④吸头应浸入液面2—3mm处吸取； ⑤严禁将有液体的移液器平放或倒置； ⑥混匀沉淀时，将吸头紧贴于沉淀上方管壁，反复吸取液体，将沉淀反复混匀，溶解； ⑦每周用75%乙醇清洗一次，若有污染随时清洗。 第二十二页，共57页 （二）实验室布局不合理引起的污染问题 1、样品处理不进行隔离，样品中各种核酸片 段均会通过空气进行传播。 2、PCR结果检测实验室和其它实验室在一 起，会出现严重的扩增子污染。 3、仪器设备及工作服等（尤其是加样器）公 用，也会造成严重污染。 4、实验室操作垃圾（吸头、离心管、样品杯 等）乱 放，飘散在空气中的核酸片段、病原微生物可造成实验室 污染。 第二十三页，共57页 （三）PCR操作中存在问题分析 1.阳性变阴性 2.阴性变阳性 3.PCR结果不稳定 第二十四页，共57页 1.阳性变阴性 (1) 有些阳性病人，经过PCR检测后为阴性，可能有两种情况： 一是采集标本方法或部位不正确， 二是如果病人取样部位病原体消失，需根据病人的病理情况采样。 第二十五页，共57页 (2) 标本保存不当，可引起PCR失败。 收集的标本乱放（未放冰箱），病原体的破裂，检测的核酸降解，失去了PCR