美国及欧洲药典系统适应性要求.docx

系统适应性 —— 美国药典 K 为常数 0.349 ，由公式 k=(0.6/) ×90(%t ,5/) 系统适应性是气相和液相色谱分析方 法的重要组成部分， 用于证明色谱系统的分离度和重现性能满足样品的分析要求。 测试基于这样的原理：仪器、电路、方 法和样品组成一个整体系统， 我们可以对这个系统进行测试评估。 影响色谱系统的因素包括： 流动相的组成、离子强度、温度和 pH 值 柱子大小、流速、柱温和压力 固定相特点， 包括填料类型， 载体形状、粒径、孔径、表面积等。 常用固定相为反相硅胶， 以十八碳烷基健合硅胶最常用， 其它经过化学修饰的硅胶也有使用。 分离度 Rs 是理论塔板数 n 的函数（也叫柱效），α是分离因子， k 是容量因子 （所有符号的意义见前文 “色谱定义和说明”部分）。在规定的色谱条件下， n 表示洗脱物中相邻化合物的分离程度， 可作为衡量色谱系统柱效能的指标， 但是不如直接测试的结 果可靠。 峰的尖锐程度部分反映柱效， 这个参数对检查微量物质至关重要。 标准品或者标准溶液需要重复进样以 确保精密度。除非个论中有规定 , 系统适用性五针的数据的相对标准偏差不超过 2.0%, 如果超过 2.0% 的话 , 需要进样六针。 在含量测定中，如果纯品含量 100% ， 则相对标准偏差没有最大值限制， 这个值可根据多次进样对照溶液来计算： %RSD=KB/t 90% ， n-1 计算得来， 表示 B=1.0 时六次进样的相对标准偏差。 B 是个案中规定的上限。 n 是对照溶液的进样次数 （ 3≤ n≤6），t90%,n - 1 是自由度为 n- 1、置信水平为 90% ，双侧检验时的t 值。 除非另有规定， RSD 不能超过下表中的值。此规定不适用于相关物质检测。 Relative Standard Deviation Requirents 进样次数 B% 3 RSD 4 上限 5 6 2.0 0.41 0.59 0.73 0.85 2.5 0.52 0.74 0.92 1.06 3.0 0.62 0.89 1.10 1.27 对称因子 AS ，用于衡量峰的对称性， 完全对称时值为 1。拖尾越严重， AS 的值越大（见图 4 ）。偶尔也会有值小于 1 的情况。如果对称因子和 1 的差值越大， 则积分的精密度越差。 信噪比（ S/N ）是系统适应性的一个重要参数，计算公式如下（图 5 ）： S/N = 2H/h 在分析之前能仔细考虑。 在梯度洗脱中不推荐改变流动性组成， 如果必须改变， 则只对溶剂体积或滞后体积改变。 流动相 pH（ HPLC ）：在配备流动相时，水相缓冲液的 pH 波动范围在正负 0.2 个单位 缓冲液盐浓度（ HPLC ）：在满足 pH 值条件下，缓冲液中盐的浓度波动范围在± 10% 。 流动相的组成（ HPLC ）：以下调整限度适用于流动相中的小组分（比例小于等于 50% ）。这些组分的量可在正负 30% 范围内调整。但是不能超过总流动相的 10% 。下面是两相体系和三相体系组分的调整范围。 两相体系 ： H 是峰高，即峰最高点到基线的距离； h 是噪音最大值和最小值之间的差值。 系统适应性测试的数据通过重复进样标准品或者特定文件中规定的对照溶液而得到， 此文件中对相关参数的定义同样适用于其它操作条件，以下情况可做相应调整： 标准品（包括参考物质 ）对适应性测试中的 所有化合物均适用 在系统适应性测试中为改进色谱系统性能而作适当调整 对色谱系统的调整不能弥补柱子和系统本身的缺陷。 为满足系统适应性要求而对分析方法调整 时，除非另有规定， 以下每个变量的最大值都应 考虑；这些调整需要附加有效数据。 为验证新方法的系统适应性， 需要对改变条件后的分析方法重新评价。多处改动会对系统性能产生积累效果， 溶剂比为 50:50 时，50 的 30% 是 15% ，超过了10% 的限度，因此流动相比例只能在 40:60 到 60 ：40 范围内调整。 容积比为 2： 98 时， 2 的 30% 时 0.6% ，因此改变范围在 1.4： 98.6 到 2.6:97.4 三相体系： 溶剂比为 60:35:5 时，第二组分 35 的 30% 时 10.5% ，超过 10% 的限度，只能在 25% 到 45% 的范围内改变。第三组分 5 的 30% 是 1.5% 。加上组分一共同构成洗脱体系。 因此三相体系的比例 变 化 范 围 是 50:45:5 到 70:25:5 或 者58.5:35:6.5 到 61.5:35 ：3.5 。 紫外- 可见光检测器的波长： 操作过程中不允许波长有误差， 厂家或者其它机构对检测器波长的校正误差不超过 3nm 。 固定相 : 柱长：可变范围为原柱长