实验一双向琼脂扩散试验.pptxVIP

实验、双向琼脂扩散试验;实验目的：;可溶性抗原（如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等）与其相应的抗体相遇后，在电解质参与下，抗原抗体结合形成白色絮状沉淀，出现白色沉淀线，此种现象称为沉淀反应。 沉淀反应中的抗原叫沉淀原（precipitinogen）,与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀素（precipitin）。 沉淀反应主要包括有环状沉淀反应、絮状沉淀反应和琼脂扩散反应。; 将可溶性抗原和抗体置于琼脂凝胶板的对应孔中，两者各自在凝胶中向四周自由扩散， 当抗原与抗体相遇，在比例合适时形成可见的白色沉淀线。沉淀线的特征与抗原抗体的浓度、纯度和扩散速率等有关。 ;一种抗原抗体系统只出现一条沉淀带 根据沉淀带出现的数目、位置以及相邻二条沉淀带之间的融合、交叉、分枝等情况，就可了解该复合抗原的组成。 ?; 免疫学及免疫学检验; 免疫学及免疫学检验;抗体效价滴定 用梅花型孔，中间放抗原， 周围孔放下不同稀释度的 相应抗体，以出现沉淀线 的最高稀释倍数为该抗体 的效价。 ;材料与试剂 1．琼脂粉 2．微量加样器、打孔器、载玻片、湿盒、温箱 3. 抗原 健康人血清，用生理盐水做1:5-1:40系列倍比稀释 5. 抗体 羊抗人IgG抗血清;操作方法 1