临床检验技师-临床免疫学和免疫检验讲义第三章免疫原和抗血清的制备.docx

第三章 免疫原和抗血清的制备 第一节 免疫原的制备 免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。 一、颗粒性抗原的制备 细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。 细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。 细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。 颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法。 二、可溶性抗原的制备和纯化 （一）组织和可溶性抗原的粗提 蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原。 组织匀浆的制备 1）高速组织捣碎机法； 2）研磨法：组织匀浆液要离心沉淀，沉淀物为组织和细胞碎片，上清液为提取可溶性抗原的材料。 细胞的破碎 1）反复冻融法： -20 ℃冷冻， 30～ 37℃融化。 2）超声破碎法 3）自溶法 4）酶处理法：胃蛋白酶或胰酶。 5）表面活性剂处理法：十二烷基硫酸钠。 免疫球蛋白片段的制备 1）非共价键解离法：改变 pH 环境或用变性剂。 2）共价键解离法：还原法或氧化法解离二硫键。 3）溴化氰裂解法：溴化氰裂解蛋白质肽链。 第 1页共6页 （ 4）酶解法：木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶。 （二）可溶性抗原的提纯和纯化 超速离心法：适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原，不适用于大多数中小分子抗原。 选择性沉淀法： 1）核酸去除法：核