茯苓等9种中药植物雌激素活性筛选的实验研究.docVIP

茯苓等9种中药植物雌激素活性筛选的实验研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：茯苓等9种中药植物雌激素活性筛选的实验研究 1 1 材料 3 2 方法 3 3 结果 5 4 讨论 5 文2：数学能力的实验研究 6 一、实验目的、任务 6 二、实验材料和实验对象 7 三、实验方法 7 四、讨论 7 五、对教学工作的建议 11 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 茯苓等9种中药植物雌激素活性筛选的实验研究 文1：茯苓等9种中药植物雌激素活性筛选的实验研究 Abstract：ObjectiveTo evaluate the estrogenic activity of several kinds of Chinese herbal medicines. MethodsE-Screen and Yeast Estrogen Screen technology were used to study the estrogenic activity of nine Chinese herbal medicines. ResultsThe two methods detected estradiol at very low concentration as 1×10-13mol/L. It was found that Angelica acutiloba Kitagawa Hikono.,Alisma orientale Juzepczuk.,Cnidium officinale Makino.,Paeonia suffruticosa Andr.,Cinnamomum cassia Blume. had estrogenic effects, while Poria cocos Prnus peica Batsch. lacked estrogenic effects at this E-SCREEN test is seitive, rapid and easy to s suitable for large-scale screening for estrogenicity of environmental chemicals. Key words：E-SCREEN; Yeast Estrogen Screen; Estrogenic activity 植物雌激素（phytoestrogen，PE）根据分子结构的不同主要包括5类:黄酮类、木脂素类、香豆素类、二苯乙烯类、真菌等［1］。通过人乳腺癌细胞系MCF-7［2］检测雌激素活性的方法及酵母菌雌激素筛检试验法（Yeast Estrogen Screen）［3］对茯苓是否具有植物雌激素作用进行了研究。 MCF-7人乳腺癌细胞是最常用的检测雌激素样活性的细胞株，Soto最早从雌激素依赖的转移性乳腺癌分离并建株。在此后的研究中，发现该细胞含有雌激素受体，在雌激素作用下增殖，而且只对雌激素样物质产生效应，对其它非雌激素样化学物无效，Soto等把它检验雌激素的方法，并称为E-screen实验。酵母菌雌激素筛检实验目前最常见的是应用转染了hERcDNA和与编码β-半乳糖苷酶的LacZ基因相连的雌激素反应元件（ERE）的菌株。当经过E2或外源性雌激素处理后，YES系统中β-半乳糖苷酶活性显著增加。本研究中应用E-screen实验和酵母菌雌激素实验法对茯苓等中药进行了雌激素活性筛选研究。 1 材料 药物 当归Angelica acutiloba Kitagawa Hikono.(日本北海岛);川芎Cnidium officinale Makino.; 桂皮 Cinnamomum cassia Blume.; 桃仁 Prnus peica Batsch.;泽泻 Alisma orientale Juzepczuk.;茯苓Poria cocos wolf.白术Atractylodes japonica Koidzumi ex Kitamura.; 芍药Paeonia lactiflora Pallas.; 牡丹皮Paeonia suffruticosa Andr.（购于日本药局方）。各药材分别用10倍量水煮提两次，过滤，合并滤液并减压浓缩，真空干燥后配制成1mg/ml的水提液。 试剂 EMDM培养基、无酚红EMDM培养基、17β-雌二醇、β-半乳糖苷酶、酵母菌株、SD培养基、Zymolase试剂（为Sigma公司产品），邻硝基苯-β-D-半乳吡喃糖苷（ONPG，日本和汉药研究所提供），胎牛血清（FBS，日本和汉药研究所提供），