桑毛色二孢根腐病的病原、发生规律及其防治研究-植物病理学专业毕业论文.pdfVIP

桑毛色二孢根腐病的病原、发生规律及其防治研究 摘要 由可可毛色二孢侵染桑树引 的根腐病是我国桑树生产上的一种新病害，为有 效防控该桑树根腐病，本文对该病的病原鉴定、病原菌遗传多样性、光照对病原菌 生长的影响、病害发生规律及防治等方面进行了研究，得出如下主要结果： 1、从发病地采集的870个桑树病根组织块中分离出12种真菌，分离率以菌株 XYl4为最高，达90％。根据致病性测定、致病菌形态特征观察和基于rDNA—ITS和 EFl ．仅序列测定分析等结果，将XYl4鉴定为可可毛色二孢菌 (Lasiodiplodia theobromae(Pat．)GriffonMaubl．)。由可可毛色二孢菌引起的桑树根腐病首次在中 国发现。 2、通过比较桑毛色二孢根腐病菌在光照和黑暗培养条件下的菌落生长速度和分 生孢子萌发情况，发现光照和黑暗对桑毛色二孢根腐病菌的菌丝生长和分生孢子萌 发没有显著影响。持续光照有利于L．theobromae分生孢子器和分生孢子的产生。光 照培养两天后，PDA平板上即出现子座芽点，随着培养时间的延长，子座逐渐增大 增粗。 3、本文利用RAPD和ISSR两种分子标记技术分析了不同地理和寄主来源的29 个可可毛色二孢菌株的遗传多样性。其中23株菌株是来自广西横县、宜州、鹿寨、 象州的桑毛色二孢根腐病菌菌株，6株来自广西武鸣县剑麻叶斑病菌 (Lasiodiplodia theobromae)菌株。两种分子标记结果显示，参试菌株的平均多态率均在93％以 上。RAPD分子标记的菌株遗传相似系数范围为0．61．0．92，而ISSR分子标记的菌株 遗传相似系数在0．69．0．99之间。利用NTSYSpc软件(Version 2．10e)分别构建 RAPD 标 记 和 ISSR标 记 的UPGMA 系 统 聚类 图 。RAPD 标 记 的UPGMA 聚类 图将 29个菌株分为7个类群 (遗传相似系数为0．76时)：ISSR标记的UPGMA聚类图将 参试菌株划分为5个类群 (遗传相似系数为O．746时)。RAPD类群和ISSR类群均 与菌株的地理来源有相关性。两种分子标记的结果均反映出不同居群间遗传一致度 较高，遗传距离较短。 4、病害调查结果显示，桑毛色二孢根腐病的发病率和严重度与桑树树龄、根结 万方数据 线虫为害及桑树品种有关。不论是幼年桑树，还是成年桑树，均可发生根腐病，但 树龄越大，发病越严重。几乎所有根腐病为害的桑树根部均有根结线虫的瘿瘤 (根 结)存在，但是部分有根结线虫为害的桑树，没有表现根腐病症状。本研究调查了 广西横县、宜州市、象州县和鹿寨县共11个桑树品种4-6年树龄的桑毛色二孢根腐 病发生情况，结果发现品种沙2x109的发病率最高，品种抗青283的发病率最低。 5、研究了哈茨木霉(Trichoderma harzianum)GZ一5、深绿木霉(Z atroviride) ST-1、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Bll、解淀粉芽孢杆菌(B． amyloliquefaciens)YZl4．3和一株寡雄腐霉 (Pythium oligandrum)对L．theobromae 的拮抗作用。结果表明，五种生防菌株均能有效抑制L．theobromae的菌丝生长。其 中，P oligandrum、Bll和YZl4．3对L．theobromae菌丝生长的抑制率分别为 88．89％、75％和7313％。两株木霉菌株对L．theobromae菌丝生长的拮抗系数级别均 为Ⅲ级。显微镜下观察发现，P oligandrum和木霉菌丝紧紧缠绕L．theobromae菌丝 并致使L．theobromae菌丝畸形、膨大；两株芽孢杆菌可引 L．theobromae菌丝内含 物泡状化、菌丝畸形膨大、易断裂。L．theobromae的分生孢子在P oligandrum、深 绿木霉和哈茨木霉培养液中的萌发率低，分别为6％、20．4％和12．2％；在两株芽孢 杆菌的培养液中不仅不能萌发，而且分生孢子因细胞壁降解而解体。 6、研究了9