铜绿色假单胞菌的生物危害评估报告.docx

铜绿色假单胞菌的生物危害评估报告 一、一般生物学特性概述 1、起源 绿脓杆菌（p.aeruginosa）或称铜绿色假单胞菌，是一种致病力较低但抗药性强的杆菌。广泛存在于自然界，是伤口感染较常见的一种细菌。能引起化脓性病变。感染后因脓汁和渗出液等病料呈绿色，故名。绿脓杆菌（p.aeruginosa）属假单胞菌属(pseudomonas)，广泛分布于自然界及正常人皮肤、肠道和呼吸道，是临床上较常见的条件致病菌之一。 绿脓杆菌的学名是Pseudomonas aeruginosa，当中的Pseudomonas是由希腊语的pseudo及monas所组成，意即虚假的单元，是早期微生物学用作描述病菌的。而Aeruginosa则是铜绿（即铜与空气中的氧气、二氧化碳和水等物质反应产生的物质，又称铜锈。化学式Cu2(OH)2CO3），正好表达了这种细菌所产生的青色色素。绿脓菌素的生物合成是以群体效应来调控，就像充满囊肿性纤维化病人肺部绿脓杆菌的生物膜一样。 2、基因组及基编码产物 铜绿假单胞菌的基因组(G+C)%为67.2%，其GM-PFGE分型常用的限制性内切酶有SpeⅠ,DraⅠ，xbaⅠ等。它们的酶切片段均少于50条，且多集中于电泳凝胶的前部。XbaⅠ的切割位点最多，speⅠ最少抗原构造绿脓杆菌有菌体o抗原和鞭毛h抗原。一是o抗原含有内毒素和原内毒素蛋白质两种成份。原内毒素蛋白质是一种高分子、低毒性，免疫原性强的保护性抗原，不仅存在于不同血清型绿脓杆菌中，而且广泛存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌、大肠杆菌、 霍乱弧菌等g-细菌中，是一种良好的交叉保护抗原。二是脂多糖，与特异性有密切关系 3、形态特征 长约1.5～3.0×宽0.5～0.8um，g-。单在，成对或偶尔成短链，在肉汤培养物中可以看到长丝状形态。菌体有1-3根鞭毛，运动活泼。能形成芽胞及荚膜。易被普通染料着染，革兰氏阴性。DNA中的G+C克分子为67.2%。 4、培养特性 生长要求及培养特性本菌为需氧或兼性 厌氧菌，在普通培养基上易于生长，培养适宜温度为35度，PH值为7.2。 　　普通琼脂 形成光滑，微隆起，边缘整齐波状的中等大菌落。由于产生水溶性的绿脓素（呈蓝绿色）和荧光素（呈黄绿色），故能渗入培养基内，使培养基变为黄绿色。数日后，培养基的绿色逐渐变深，菌落表面呈现金属光泽。 　　普通肉汤 均匀混浊，呈黄绿色。液体上部的细菌发育更为旺盛，于培养基的表面形成一层很厚的菌膜。但广泛使用有效抗生素后筛选出的变异株常丧失其合成能力。 血液琼脂 由于绿脓杆菌能产生绿脓酶，可将红细胞溶解，故菌落周围出现溶血环 5、流行特性 铜绿色假单胞菌是 假单胞菌属中的主要种别，也是临床上引起各种感染的主要致命病菌，在所有的 医源性感染中占5%～15%。铜绿色假单胞菌在自然界分布广泛，为土壤中存在的最常见细菌之一，正常人的皮肤、肠道和呼吸道等处都有此菌存在。铜绿色假单胞菌为机会致命病菌，是 医院内感染的主要 病原菌之一。 　　铜绿色假单胞菌 脑膜炎常发生于开放性颅脑损伤、脑 外科手术后，或因腰椎穿刺、腰麻等消毒不严或器械污染所引起：大面积 烧伤患者的创面感染，有严重基础 疾病如 肿瘤、 血液病，免疫缺陷病、糖尿病等，以及使用 抗生素、肾上腺皮质激素等药物和留置体内导管如心导管、导尿管等，均可引起铜绿色假单胞菌败血症，继而引起脑膜炎 二、致病性和感染剂量 绿脓杆菌能产生多种与毒力有关的物质，如内毒素、外毒素a、弹性蛋白酶、胶原酶、胰肽酶等，其中以外毒素a最为重要。绿脓杆菌外毒素a为一种热不稳定的单链多肽，分子量约66，000，经甲醛或戊二醛处理可脱毒为类毒素，并被特异性抗毒素中和。毒性强，注入动物后，主要靶器官肝脏可出现细胞肿胀、脂肪变性及坏死；其他脏器病变有肺出血和肾脏坏死。外毒素a机理与白喉毒素有些类似，即最终使核糖体上延长因子2（ef～2）失活，抑制宿主细胞的蛋白质合成，但具体过程不同。此外，外毒素a和白喉毒素在蛋白质结构、免疫原性、鞭细胞和敏感动物等方面均有差异。 　　绿脓杆菌感染可发生在人体任何部位和组织、常见于烧伤或创伤部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道。也可引起心内膜炎、胃肠炎、脓胸甚至 败血症。患者感染后可产生特异性抗体，有一定的抗感染作用。应用抗绿脓杆菌免疫力血清可降低病人继发败血症的发生率和病死率。铜绿色假单胞菌的内毒素可引起 发热、 休克及 急性呼吸窘迫综合征等，外毒素A则为一种动物死亡的致死因子，可裂解烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）中烟酰胺部分催化腺苷二磷酸核糖与EF-2的共价结合，导致核糖体密码移动过程的阻断，从而阻止细胞蛋白合成，使组织坏死，造成局部或全身疾病过程。机体对铜绿色假单胞菌的免疫主要是