T载体与目的基因连接.docxVIP

T质粒载体 重组的DN心子是在DNAt接酶的感化下，有Mg2 .ATP消失的衔 接缓冲体系中，将分离经酶切的载体分子与外源 DNA分子进行衔接 DNAt接酶有两种：T4噬菌体DNAt接酶和大肠杆菌 DNAt接酶. 两种DNA衔接酶都有将两个带有雷同粘性末尾的 DN心子连在一 路的功效，并且T4噬菌体DNA衔接酶还有一种大肠杆菌 DNAt接 酶没有的特征，即能使两个平末尾的双链 DN心子衔接起来.但这 种衔接的效力比粘性末尾的衔接率低 ，一般可经由过程进步 T4噬 菌体DNA衔接酶浓度或增长DNA^度来进步平末尾的衔接效力. T4噬菌体DNA衔接酶催化DNA衔接反响分为3步：起首,T4 DNA