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RNA Biosynthesis (Transcription);转录（transcription） 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 ;转录与复制的相似点： 　1. 模板均为DNA； 　2. 延长机理都是形成磷酸二酯键； 　3. 方向均为5′→3′。　; 转录和复制的区别;参与转录的物质; 第一节 转录的模板和酶 Templates of Transcription and Enzymes;一、转录模板 ; 　　　双链DNA分子中能作为模板转录出RNA的那条链，称为模板链。又叫有意义链（sense strand）或Watson链。 　　　另一条互补链称为编码链，又叫反义链（antisense strand）或 Crick链。; 　　　转录产物RNA的碱基序列，除了 T 变U 外，其余与编码链相同。 ;不对称转录 　　(asymmetric transcription) 在DNA分子双链上某一区段，一股链可转录，另一股链不转录； 模板链并非永远在同一单链上。 ;?;RNA聚合酶全酶及核心酶电泳图谱 ; E. coli RNA聚合酶组分; 　　其他原核生物的RNA聚合酶，在结构、组成、功能上均与E.coli相似。 　　原核生物的 RNA聚合酶都受一类抗 结核药利福平或利福霉素的特异性抑制。这类药物能与RNA聚合酶的?亚基特异结合，从而影响酶的活性。;RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;2. 真核生物的RNA聚合酶;　　　RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都由多个 亚基组成。有些亚基是三种酶所共有。 　　mRNA是各种RNA中寿命最短、 最不稳定的，需经常重新合成。因此RNA聚合酶Ⅱ是三种酶中最活跃的。; 三、酶与模板的辨认结合 原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)，包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。 　RNA聚合酶结合模板DNA的部位称为启动子(promoter)。是调控转录的关键部位。;RNA聚合酶保护法;开始转录;21;原核生物启动子 －35区：一致性序列为TTGACA 是RNA-pol的辨认位点 －10区：一致性序列为TATAAT 又叫Pribnow盒 是RNA-pol的结合位点;真核生物启动子; 第二节 转录过程 The Process of Transcription; 分为三个阶段： 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination) ;一、原核生物的转录过程;2. DNA双链解开。;RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3?;（二）转录延长;30; 转录泡（transcription bubble）??? 在转录延长过程中，由局部打开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA三者结合在一起的复合体，为空泡状结构，又称转录复合物。;32;电镜下原核生物转录过程中的羽毛状现象;转录的起始及延长过程 ; (三) 转录终止 　　RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 　　　 　　　; 1. 依赖ρ因子的转录终止 ?因子是同六聚体蛋白； ?因子能结合RNA，与poly C的结合力最强； ?因子还有ATP酶和解螺旋酶的活性。 ;37; 2. 不依赖ρ因子的转录终止 　DNA模板上靠近终止处，有特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。;39;40;茎环结构终止转录的机理;42;二、真核生物的转录过程;转录起始点;2. 转录因子 ;参与RNA-pol Ⅱ转录的TFⅡ ;3. 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) ;TBP;4. 拼板理论(piecing theory) ;（二）转录延长;RNA-Pol;（三）转录终止; 第三节 真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional Modification ; 一、mRNA的转录后加工 (一)首尾的修饰 1. 5′-端加帽：m7GpppG—— 2. 3′-端加尾：多聚腺苷酸 (poly A);帽子结构;5? pppGp…;加帽过程;（二）mRNA的剪接;真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 ;2. 外显子(exon)和内含子(intron) ;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;鸡卵清蛋白基因;3. mRNA的剪接;64;二次转酯反应;? R