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成年小鼠心脏灌流 成年小鼠心脏灌流 成年小鼠心脏灌流 成年小鼠心脏浇灌 实验资料 ：需要察看脑切片的小鼠 试剂 / 试剂盒：乙醚；生理盐水（ 37℃水浴）； 4%PFA； 30%蔗糖仪器：蠕动泵；剪刀；镊子；针头；导管 实验步骤 ： 1、准备实验器械：两个锥形瓶（ 1 个装生理盐水，一个装 4%多聚甲醛，记得要用封口膜封口） 2、用生理盐水冲刷导管，并清除管内气体。（浇灌时采用雄性动物比采用雌性动物要好，原由是雌性动物受其激素周期影响，雄性的结果更为靠谱） 3、在密闭容器内加适当乙醚，麻醉小鼠。（需要注意的是，小鼠清醒一点比死掉要好，防备血液凝结给浇灌带来阻力） 4、待小鼠麻醉后立刻将其用针头固定在泡沫板上（用针头插住四肢）。 5、一只手用镊子扯起胸部皮肤，另一只手用剪刀剪开胸腔的皮肤和肋骨，裸露出心脏和肝脏。 6、将注射针头插入小鼠左心室（如针头不稳可用镊子将其固定在泡沫板上），同时将小鼠肝脏减掉，以使血液流出。浇灌速度 5.8rpm 。（灌输生理盐水的时间保持在 10min 左右，血液清除后四肢、肝脏和舌头会变白） 7、对小鼠进行剪尾取样，以备测定其基因型。同时，将小鼠信息卡片上记录浇灌信息，并将浇灌小鼠的信息记录在自己的实验记录本上，以方便后续的从头基因型判定操作。 8、待小鼠四肢、肝脏和舌头变白以后，将导管始端从生理盐水中取出，将其放 入冰浴的 4%PFA溶液（ 4℃）中，