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高中生物实验的染色与颜色观察 例3使用染色剂染色是生物学实验常用的方法，某同学对有关实验做了如下归纳： 实验 观察对象 染色剂 实验结果 ① 花生子叶细胞的脂肪颗粒 苏丹Ⅲ 脂肪颗粒被染成橘黄色 ② 人口腔上皮细胞中的DNA和RNA分布 吡罗红甲基绿 细胞内染成绿色的面积显著大于染成红色的面积 ③ 人口腔上皮细胞中的线粒体 健那绿 线粒体呈现蓝绿色 ④ 洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂 龙胆紫 间期细胞不着色，分裂期细胞染色体着色 高中生物实验的染色与颜色观察 （1）上述实验结果的归纳，正确的有_______（实验序号）。 （2）实验②和实验④在染色之前，都使用了一定浓度的盐酸处理。其中，实验②用盐酸可改变______通透性，加速染色剂进入细胞；实验④用盐酸与酒精混合，对材料进行解离。在两个实验操作中，都要注意盐酸浓度，处理材料时的温度和______。 （3）健那绿使线粒体着色与线粒体内膜的酶系统有关。线粒体内膜上的酶主要催化有氧呼吸的第______阶反应，该反应变化是 __________ __。 ①③ 细胞膜 时间 三 [H]与氧结合形成水，同时释放大量的能量 高中生物实验的染色与颜色观察 解析：使用甲基绿和吡罗红进行染色体色时，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。DNA主要存在于细胞核，而RNA存在于细胞质中，因此应该是呈现红色的面积较大。使用龙胆紫对洋葱根尖分生区细胞进行染色时，染色体被染色，在间期细胞核被染成深色，在分裂期可看到染色体。②④不正确。 在高中生物实验中有多处用到盐酸，观察DNA和RNA的实验中盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进人细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。在根尖分生组织细胞的有丝分裂实验中，盐酸和酒精混合液起解离作用。解离时间过短根尖分生区的细胞不易分散开，解离时间过长细胞太酥软不易取出。在线粒体在内膜上进行有氧呼吸的第三阶段，前两阶段产生的[H]在第三阶段与氧气结合生成水同时释放大量的能量。 高中生物实验的染色与颜色观察 高中生物实验的染色与颜色观察 高中生物实验的染色与颜色观察 染色剂的染色与显微镜的观察 显微镜观察的是透射光而不是反射光，所以对于大部分无色半透明的生物组织细胞结构来说，需用特殊的方法制片染色处理后才能用显微镜观察清楚。而且生物材料很少是单层细胞结构的，故还需要进行切片或压片、涂片等处理操作。 如果观察经过染色剂染色的生物材料，如观察洋葱根尖分生区有丝分裂实验时要用较强的光照。而不经染色的生物材料在显微镜下观察时，光线尽可能的较暗些。如观察质壁分离与复原实验时，如果光线太强，不容易观察到液泡。 高中生物实验的染色与颜色观察 碱性染料与染色体的观察 生物实验中所用的染料，按其来源可分为天然染料和人工染料两大类。人工染料根据其主要化学成分的性质，又分成碱性染料、酸性染料和中性染料三大类，其碱性、酸性和中性是由染料中有色部分的性质所决定的。若染料的有色部分为阴离子，即为“酸性”染料；若染料的有色部分为阳离子，则称为“碱性”染料；若染料的阴、阳离子均有颜色，则称为“中性”染料。染色体(质)是细胞核内容易被碱性染料染成深色的物质。 高中生物实验的染色与颜色观察 在观察植物细胞有丝分裂实验中，常用龙胆紫溶液使染色体染成紫色，也使用醋酸洋红溶液使染色体着红色。二者染色时间都不可过长。 １％～ ２％龙胆紫溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。龙胆紫溶液的配制是将龙胆紫溶解在质量分数为2％的醋酸溶液中配制而成。染色中使用的龙胆紫溶液略呈酸性， l％醋酸洋红本身也是酸性，同样具有碱性的助色基团。 配方中的醋酸是染料的溶剂，在染色时增加了细胞的通透性，利于染液的离子进入细胞而使细胞核内的染色体着色 。 此外，改良苯酚品红溶液也可使染色体着色。 应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂等。 高中生物实验的染色与颜色观察 DNA和RNA的染色鉴定 甲基绿和吡罗红是混合染色剂。 甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末 。溶于水 ，显蓝绿色。稍溶于乙醇，不溶于戊醇 。吡咯在盐酸作用下聚合成为吡罗红，可与 RNA结合呈现红色。 这两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以观察到DNA和RNA在细胞中的分布情况。 注意：①盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进人细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。② 2种染色剂要混合使用，而且要现配现用。 高中生物实验的染色与颜色观察 活体染色剂健那绿和亚甲基蓝 健那绿染液是专一性的线粒体的活细胞染料，线粒体中细胞色素氧化酶使染料