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体外受精和早期胚胎培养 会计学第2页/共28页国产奶牛:年均产奶量3000公斤左右国际良种奶牛:年均产奶量10000公斤左右我国蒙古黄牛:均重300Kg海福特肉用牛:2岁体重可达800Kg存在的问题:1.引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元2.牛的生育率低,一头牛一胎只一个,一生只能生育四五次第3页/共28页牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右公牛产生的精子数目就更多了伟大设想诞生了第4页/共28页试管动物技术(1)概念:通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术(2)过程精子移植子宫受精卵早期胚胎卵子个体第5页/共28页从试管牛说起实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是(体外受精 )和(早期胚胎)的培养体外受精:采取雌性动物的(卵细胞)和雄性动物的(精子),使其在(试管)中受精。注:但发育的主要场所是(母体)第6页/共28页1.思考一下,试管动物和克隆动物的比较?试管动物克隆动物生殖方式技术手段遗传规律有性生殖 无性生殖体外受精、胚胎移植核移植技术、胚胎移植遵循不遵循第7页/共28页二、体外受精:步骤1、卵母细胞的采集和培养2、精子的采集和获能3、受精第8页/共28页用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,然后,从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。对不同动物,采取卵母细胞的方法不同第9页/共28页不同动物,采集卵母细胞的方法不同:实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等卵细胞的采集: Ⅰ最常用的方法是卵巢经过 处理。 具体做法是给供体注射 ,使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后从 中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。超数排卵促性腺激素输卵管第10页/共28页大家畜或大型动物,如牛,卵细胞的采集: Ⅱ从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞; Ⅲ也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置,直接从活体动物中吸取泡卵液(连同卵母细胞)取出。卵巢超声波(B超)探测仪内窥镜腹腔镜注意:后两种方法采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。 第11页/共28页活体采集的牛卵母细胞第12页/共28页超声波探测仪第13页/共28页第14页/共28页卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱第15页/共28页培养箱第16页/共28页不同1.不同方法采集的卵母细胞成熟程度相同吗? 能不能直接用于体外受精? 为什么?不能。初级卵母细胞,体外培养至MII中期2.如何让雌性动物排出更多的卵细胞?超数排卵,给供体注射促性腺激素。 收集精子的方法有:第17页/共28页精子的收集和获能假阴道法手握法电刺激法第18页/共28页受精 获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下在 或中完成受精过程。获能溶液专用受精溶液第19页/共28页获能的精子+成熟的卵子(MII) 受精卵获能液或受精液胚胎发育培养液第20页/共28页三、 胚胎的早期培养培养液成分:有机盐、无机盐、激素、维生素、氨基酸、核苷酸、血清等第21页/共28页目的:检查受精状况和受精卵的发育能力。培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷动保存。桑椹胚阶段:牛、羊不同动物胚胎移植时间不同8个或16细胞胚阶段:小鼠、家兔4个细胞胚阶段:试管婴儿第22页/共28页1.以牛为例,从屠宰场收集卵巢中的卵母细胞进行体外受精的应用效果如何?目前,从屠宰场废弃的卵巢中,每个卵巢平均可采集10枚左右可用卵母细胞,经体外培养成熟和受精后约可获4枚可用的胚胎,经过移植给受体母牛,最终可得到1~2头犊牛。牛的体外受精胚胎的工厂化生产已在一些发达国家开展。第23页/共28页采集良种母牛卵母细胞采集良种公牛精子第24页/共28页卵母细胞的体外培养精子体外获能“试管牛”工业化生产的技术流程图体外受精良种牛体外受精胚胎胚胎移植受体牛良种犊牛成熟期牛采集卵巢中卵母细胞屠宰加工厂市场第25页/共28页小结:试管牛工厂化生产技术流程体外受精( )(包括卵细胞采集、精子的获能、受精等步骤) ( ) ( ) ( ) 良种牛犊 成熟期牛早期胚胎的培养胚胎移植代孕母牛例题1 从澳大利亚和新西兰引进一流良种无角道赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊,能否设计一种快速繁殖子代个体,而又大大缩短良种本身周期的办法?简述其具体的过程。第26页/共28页 能。分别取赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊的卵母细胞和精子,然后做以下处理:卵母细胞培养成熟 精子获能体外受精早期胚胎受精卵胚胎移植发育普通羊子宫里幼体分娩小结第2
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