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流式配色分析及实验设计;pe;流式细胞技术： 在细胞分子水平上； 通过单克隆抗体； 对单个细胞或其他生物粒子；进行多参数； 快速的； 定量分析。;光学系统：经荧光染色的细胞在激光的照射下产生散射光和荧光信号，同时被前向光电二极管和一组光电倍增管（PMT）接收，荧光信号经一系列双色性反射镜和带通或长通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号;;;外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后）;1、我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第二个是技术进步的导向，第三大导向是竞争对手的行为导向。 2、市场销售中最重要的字就是“问”。 3、现今，每个人都在谈论着创意，坦白讲，我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。 4、在购买时，你可以用任何语言；但在销售时，你必须使用购买者的语言。 5、市场营销观念：目标市场，顾客需求，协调市场营销，通过满足消费者需求来创造利润。**** 6、我就像一个厨师，喜欢品尝食物。如果不好吃，我就不要它。***** 7、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务，因为我就是顾客。*** 8、利人为利已的根基，市场营销上老是为自己着想，而不顾及到他人，他人也不会顾及你。**** ;荧光信号;光学系统：滤光片;流式结果除了染色的每个荧光抗体的表达情况，还包含了细胞的大小和复杂程度的情况 FSC：前向角散射光，值越大，细胞越大 SSC：侧向角散射光，值越大，细胞越复杂;双参数散点图;;多色组合原则;流式细胞术中常见的荧光抗体一览;荧光素;荧光素;CD5;三大类: Primary: 很好鉴定，容易区分阴阳性细胞群，阴阳性峰分得很开 Examples: CD3, CD4, CD45 Secondary: 很好鉴定，较高水平表达，经常连续性表达 Examples: CD27, CD28, CD45RA, CD45RO Tertiary: 低水平表达，激活性marker，或者表达区分不明显 Example: CD25; ; ; ; ; ; ;避免补偿;避免补偿;0 hours;选择更稳定的偶联染料：;;多色组合原则;优宁维流式免费课堂;CD19;通过带有荧光标记的抗体和抗原特异性结合：;流式鉴定白细胞的各种亚型：;表面蛋白流式检测步骤：;检测胞内细胞因子:;胞内因子流式检测步骤：;表面染色和胞内染??的区别？;通过固定破膜建立胞内染色通道;固定剂和破膜剂;固定剂和破膜剂;胞内因子和核内因子的同时检测：;胞内因子的含量与检测效果;胞内因子的含量与检测效果;胞内因子的含量与检测效果;胞内因子的含量与检测效果;胞内因子的含量与检测效果;胞内因子的含量与检测效果;流式实验上机模版设置和结果分析;流式实验上机模版设置;;; 非特异荧光 产生原因分两类，一类是抗体Fc段与细胞表面的Fc受体非特异结合上的荧光染料受光照发出的荧光，可使用FCR阻断剂阻断； 另细胞损伤也会导致非特异性染色，此类染色无法阻断，需用同型对照对比或进行死细胞排除。 例如：;;;;荧光补偿： 所谓“补偿”就是除去某一荧光素误入到其它荧光通道中的发射光信号。通过调节仪器完成这一步骤。往往我们通过检测带有单一荧光素的样本来减除误入其他荧光通道的信号。既单阳管。;完整的流式实验方案;阴性对照与阳性对照;流式上机时的仪器条件设置;阈值设定;电压设定;补偿设定;Relative Intensity;FITC Compensation;;同一样本，调节荧光补偿前后的变化：;当实验样本珍贵/表达低时，可以选择补偿调节微球代理样本进行仪器调节：;门与设门;门与设门;特邀专家： BD IS部门 资深工程师 曾令武老师 BD PMG部门 资深工程师 郝晋 博士 BD PMG部门 高级工程师 马红 博士 优宁维 PMG部门 资深技术支持 胡冰;坚持为大家提供： 专业的方案指标选择； 专业的流式多色配色； 专业的实验技术指导； 专业的实验结果分析；;优宁维BD伴您实验无忧！