D6950中文说明书-去内毒素.pdfVIP

D6950 Endo-freePlasmidMiniKit Ⅱ √实验前请按说明书正确配制和保存SolutionⅠ 正确稀释DNAWash Buffer. 简易中文步骤 1. 将带有质粒的E.coli 接种于50mlLB/抗生素培养液中，37°C搖床培养12~16h； 2. 取10-15ml的菌液，室温下5000xg离心10min收集细菌； 3. 倒弃培养基，加入500µlSolutionI/RNaseA混和液，漩涡振荡使细胞完全悬浮； 4. 将步骤3得到的细菌重悬液转移到新2ml离心管中 ，加入500µlSolutionII ，轻轻颠倒混匀7-10次 ， 将混合液室温放置2min ； 5. 加入250µl 预冷的BufferN3，轻柔上下颠倒离心管数次至形成白色絮狀沉淀； 6. 室温≥12000xg 离心10min，转移上清液至新1.5ml离心管中； 7. 加入上清液0.1倍体积的ETRSolution ，涡旋混匀，冰浴10min，42℃水浴5min； 8. 室温12000xg 离心3min ，ETR会在管底形成蓝色沉淀； 9. 转移上清液至新的离心管中，加入上清液0.5倍体积的无水乙醇，上下颠倒混匀 ；