PCTIL-6二联检试剂检测操作流程模板-血清血浆试剂SOP文件（质控卡质控）_3749.docVIP

文件编号 版本号/修订号 A/0 二联检血清血浆检测操作流程 总页数/页码 5页 二联检血清血浆检测操作流程 检验目的 本检测试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆中降钙素原(PCT)、 白介素6 (IL-6) 含量。 2 检验程序的原理和方法 试剂盒原理:本试剂盒采用双抗夹心法原理，应用抗原抗体反应和荧光量子点免疫层析技术，检测人血中PCT、IL-6 的含量。本检测卡含有高特异性、高敏感性PCT单克隆抗体两株、IL-6 单克隆抗体两株，其中PCT单克隆抗体1、1L-6单克隆抗体I为量子点标记抗体，固定在结合垫上; PCT单克隆抗体11、IL-6 单克隆抗体II为捕获抗体，包被在层析膜上各自形成检测线。为监控试纸是否有效，设置质控线，包被有免抗鼠IgG抗体。测试时，若样本中含有PCT、L-6, PCT、1L-6首先分别与结合垫中量子点标记的PCT单克隆抗体1、IL-6单克隆抗体1结合，然后与层析膜检测线处包被的PCT单克隆抗体I1、IL-6单克隆抗体I1 结合形成“夹心”结构。 3 性能特征 3.1最低检出限： PCT: 0.01ng/ml;； IL-6: 2pg/ml。 3.2线性范围：PCT: 0.1ng/ml-100ng/ml, 其线性相关系数r≥0,990;； IL-6: 10pg/ml-4 00g/ml,其线性相关系数r≥0.990。 3.3精密度：批内差： (1)批内差 当PCT检测浓度为0.15-3ng/ml时, CV≤10.0%;；当检测浓度小于0.15ng/ml.；大于3ng/ml时，CV≤15.0%;； 当IL-6 检测浓度为100-500pg/ml 时，CV≤ 10.0%;；当检测浓度小于100pg/ml、大于500pg/ml时，CV≤15.0%。 (2)批间差: CV≤15.0%。 3.4准确度 PCT:检测浓度小于10ng/ml 时，结果误差在t 20.0%内;；检测浓度为10-100ng/ml时，结果误差在土15.0%内;； IL-6:检测浓度小于500pg/mi时,结果误差在土20.0%内;；检测浓度为500-4000pg/ml时，结果误差在土15.0%内。 4 样品类型（如血清、血浆、尿液） 血清/血浆 5 患者准备 患者血液采集前，应避免跑步、骑自行车、爬楼等剧烈的运动，要求病人休息15分钟后进行采血，冬季保持血液循环通畅，化疗病人要求在化疗前采集样本，以保证检测结果准确，采血不能与静脉输液同侧臂。 6 容器和添加剂类型 不适用。 7 所需的仪器和试剂 1.试剂盒：降钙素原/白介素6 (PCT/L-6)二联检测试剂盒(量子点免疫荧光层析法)：内含50条单人份检测卡；每人份有检测卡、干燥剂、铝箔袋组成；检测卡由试纸条外壳和试纸条组成； 试纸条：样品垫、结合垫(固定有量子点标记的PCT、IL-6鼠抗人单克隆抗体I)、NC膜(检测线包被有PCT、IL-6 鼠抗人单克隆抗体质控线包被有 兔抗鼠lgG抗体)、 吸水纸和 PVC底板。 2.仪器：干式荧光免疫分析仪 （1）移液器（满足100微升）； 8 环境和安全控制 环境温度要求：10~30℃（最佳温度：25℃）。 环境相对湿度要求：≤70% 安全控制：本产品内含有作为防腐剂的叠氮钠，叠氮钠可以和排水管道的铜管或铅管放生反应，产生爆炸物质，须按照当地的有关条例妥善处理； 对于含有感染源或怀疑含有感染源的物质应有合适的生物安全保证程序，下列为有关注意事项： 戴手套处理样本或对试剂进行消毒； 用消毒剂对溅出的样本或试剂进行消毒； 按当地的有关条例和处理所有标本、试剂和潜在的污染物。 9 校准程序 校准程序：读取试剂盒的SD卡。 10 样本要求 10.1血清血浆样本要求 10.1.1血清血浆样本的要求： （1）用于人血清、血浆样本，其它体液和样本可能得不到准确的结果； （2）应在无菌情况下采集静脉血。检测时，未经枸橼酸钠或肝素抗凝的血样须析出血清，经枸橼酸钠或肝素抗凝的血样需离心得到血浆。 10.1.2血清血浆保存： 血清血浆采血完需要在两小时内检测完毕，2-8℃保存七天，保存样本不可用于重复检测。 10.1.3血清血浆注意事项： 血清血浆采集完需要观察样本状态，溶血、黄疸、脂血现象不应用于检测。 11 检验步骤 11.1血清血浆检测 a.采血后3-5min后再离心，3500r/min 离心 15min得到澄清透明状血清或血浆。 b.用移液枪加样，先将移液枪量程调为 100ul，再吸取 100ul 血清或血浆样本。 c.把 100ul 血清或血浆样本垂直加入检测卡加样孔中（注意：取样时移液枪先按到一档