土壤酶的测定方法.docxVIP

一、脲酶测定(苯酚钠-次氯酸钠比色法) 脲酶是对尿素转化起关键作用的酶，它的酶促反应产物是可供植物利用的氮源，它的活性可以用来表示土壤供氮能力。 1、试剂配制： pH6.7 柠檬酸盐溶液：取 368g 柠檬酸溶于 600mL 蒸馏水中，另取 295g 氢氧化钾溶于水，再将两种溶液合并，用 1N 氢氧化钠将 pH 调至 6.7，并用水稀释至2L。 苯酚钠溶液：称取 62.5g 苯酚溶于少量乙醇中，加 2mL 甲醇和 18.5mL 丙酮，后用乙醇稀释至 100mL（A 液），保存再冰箱中。称取 27g 氢氧化钠溶于 100mL水中（B 液），保存于冰箱中。使用前，取 A、B 两液各 20mL 混和，并用蒸馏水稀释至 100mL 备用。 次氯酸钠溶液：用水稀释制剂至活性氯的浓度为0.9％，溶液稳定。 10％尿素溶液：10g 尿素溶于 100mL 水中。 N 的标准溶液：精确称取 0.4717g 硫酸铵溶于水稀释至 1L，则得 1mL 含 0.1mgN 的标液，再将此液稀释 10 倍制成氮工作液（0.01mg/mL）。 管作液/ml00.51.52.53.54.55.56.5苯酚钠/m氯酸钠/ml1.51.51.51.51.51.51.51.5蒸馏水定管号 1 2 3 4 5 6 7 8 工作液/ml 0 0.5 1.5 2.5