理化生动物细胞工程.pptxVIP

会计学;知识目标：;动物细胞工程的基本技术 ;一、动物细胞培养 ;; 2、过程 ①取材：选取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（分裂能力强） ②分散成单个细胞： 用胰蛋白酶(PH:8-9)或胶原蛋白酶;2、过程 ③制成细胞悬液： 用培养液将分散的细胞制成细胞悬液； ④原代细胞培养： 动物组织消化后的初次培养；;2、过程 ⑤传代细胞培养： 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，让细胞继续增殖； 10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；; ;3、动物细胞培养过程的基本概念 ①细胞贴壁：细胞在培养过程中，分散的细胞贴附在瓶壁上。 ②接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖；; 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。;;3、动物细胞培养过程的基本概念 ③细胞株： 细胞在传代培养中，传到10代左右就不容易传下去，少数细胞度过危机可继续传下去，这些存活细胞能传40—50代，这种传代细胞叫细胞株，其遗传物质没有改变。;3、动物细胞培养过程的基本概念 ④细胞系： 极少数细胞株细胞度过危机，遗传物质改变，带有癌细胞特点，可无限制的传下去，这部分细胞叫细胞系。; (1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ ; (2)为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ ; (3)胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ ; 4、动物细胞培养条件 ①无菌、无毒环境 可以培养基中加一些抗生素，以防培养过程的污染； 定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；; 4、动物细胞培养条件 ②营养条件 水、无机盐、碳源（糖）、氮源（氨基酸）、生长因子等； 可加血清、血浆等天然成分。; 4、动物细胞培养条件 ③温度和PH值 36.5±0.5OC 7.2—7.4PH; 4、动物细胞培养条件 ④气体环境 95%氧气:细胞代谢所需; 5%二氧化碳:维??培养液的PH值;; 5、实际应用 ①大规模生产生物制品; 　　②基因工程的受体细胞; 　　③培养的动物细胞用于检测有毒物质; 　　④培养正常或病变细胞，用于生理、药理、病理研究;;第22页/共53页;获得细胞; 1、动物细胞核移植技术的概念 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经失去细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成为动物个体;; 2、克隆动物的概念 用核移植方法得到的动物称为克隆动物;; 3、核移植的种类 胚胎细胞核移植:细胞分化程度低，恢复全能性容易; 体细胞核移植;细胞分化程度高，恢复全能性困难;;4、体细胞核移植的过程;去核卵母细胞; (4)为什么体细胞核移植技术要选MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞？;5、体细胞核移植技术的应用前景 ;第31页/共53页;6、体细胞核移植技术存在的问题 ;三、动物细胞融合;三、动物细胞融合;四、动物细胞融合;细胞核;三、动物细胞融合;;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备;第41页/共53页;四、单克隆抗体的制备;第43页/共53页;四、单克隆抗体的制备; 小鼠注射抗原;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备;参考资料;HAT选择性培养基;DNA分子复制的两条途径;不同细胞的DNA合成途径