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HPVL1壳蛋白染色注意事项 实验前准备：若待染玻片为加盖玻片，应在二甲苯里浸泡至自动脱落，一般秋冬天需浸泡2-3天，夏天需1-2天。 抗原修复：抗原修复液及洗液按比例配好，抗原修复液PH=5.5-6.5，抗原修 复时，玻片放置勿太紧，以免引起抗原修复不均匀。抗原修复时，先加热抗原修复液，待抗原修复液温度达到91-92T，再放置玻片。修复25-30min,冷却30min至室温（也可用冷水冲洗放置玻片的容器使之冷却至室温，此时抗原修复液不可重复利用）。 3?冲洗：洗液可用免疫组化常规的PBS代替，用PBS冲洗2-3次。 4.加液：由于B液液体较少，加B液时可用移液器，以节省液体。 5?孵育：滴加B液、C液后应分别在37C烤箱孵育60min、30min。 显色：AEC显色应在显微镜下显色，待观察到有细胞核变为红褐色，则终止显色。若开始出现背景，应及时终止显色。如果容易出现红色背景，则可适当延长抗原封固时间，缩短显色时间（显色最为重要）。 液体用量：一般一个试剂盒的液体可供70例组织片使用，55-60例细胞片使 用。抗原修复液可重复使用，但每次使用后都应放置于4C冰箱中，若抗原 修复液PH值超过6.5,应该及时更换液体。 细胞片掉片：在复染过程中，细胞片很容易脱落。可从以下方面进行解决： 减少抗原修复浸泡时间，抗原修复时温度不应过高，揭盖玻片应在洗液或PBS 中进行