钼锑抗分光光度法.docVIP

钼锑抗分光光度法 钼锑抗法测定磷含量 1实验原理 用钼锑抗分光光度法测定磷。在一定酸度和锑离子存在的情况下，磷酸根与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，它在常温下可迅速被抗坏血酸还原为钼蓝， 1在700nm波长下测定。实验的适宜酸度为0.28~0.38mol?HSO，适宜温度为24 6420~60?，显色时间为30~60min，可稳定24小时，含磷5x10~2x10%范围内符合线性关系。其有效范围为0.01mg/L—0.6mg/L。 2实验 2.1仪器:1000ml容量瓶、100ml容量瓶、试管若干、最大量程分别为5ml、 1ml、0.2ml的移液枪、分光光度计; 2.2药品:98%硫酸、抗坏血酸、钼酸铵((NH)MoO?4HO)、酒石酸锑467242 钾(KSbCHOHO) ?4471/2 2.3试剂配制 (1)1+1硫酸:浓硫酸与蒸馏水的体积比为1:1混匀; (2)10%抗坏血酸溶液:100g/L 维生素C的一种，棕色瓶，4?可保存几 周，若溶液颜色发黄，则弃去; (3)钼酸盐溶液:13g钼酸铵((NH)MoO?4HO)溶于100mL蒸馏水，467242 0.35g酒石酸锑钾(KSbCHOHO)溶于100mL蒸馏水。在不断?4471/2 搅拌的情况下把钼酸铵徐徐加到300mL1+1硫酸中，加酒石酸锑钾溶 液混匀。棕色瓶，4?可保存2个月以上; (4)磷酸盐储备溶液:110?干燥2h的磷酸二氢钾0.2197g溶于水，移入 1000mL容量瓶中，家5mL1+1硫酸，定容至1000mL。此时浓度为 50μg/mL。(以P计) (5)磷酸盐工作液:吸取磷酸盐储备液4.0ml并用蒸馏水定容至100ml(此 时溶液中磷含量(以P计)为2μg/ml); 3实验步骤 3.1标准曲线 取10支10mL比色管，按下列表格加入试剂显色，并测定吸光值A 700 编号 0 1 2 3 4 5 6 磷酸盐工作液/ml 0 1 2 3 4 5 6 蒸馏水定容至10ml 10%抗坏血酸溶液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 钼酸盐溶液/ml 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 摇匀，静置15min 10ml溶液中磷酸盐浓0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 度(以P计)/(μg/ml) A 0.013 0.047 0.080 0.119 0.156 0.183 0.224 700 A= A- A(0) — 0.034 0.067 0.106 0.143 0.170 0.211 700700 以1~6的数据作标准曲线，横坐标为配制成溶液磷酸盐浓度(μg/ml)，纵 坐标为A (此图为3月30日数据) 3.2水样的测量 从各个经预处理的水样中取0.1ml(必要时可以用稀释后水样代替记 下稀释的倍数D)至10ml比色管中，依次加入0.5ml10%抗坏血酸溶液 和0.4ml钼酸盐溶液显色后以蒸馏水为参比水样进行调零，依次测量吸光 值A，各值减去空白试验(即标准曲线0号管的吸光值)即为校正值A700 (此全过程应与标准曲线同时操作); 编号 0 A B C D E … 水样/ml 0 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 … 蒸馏水定容至10ml 10%抗坏血酸溶液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 … 钼酸盐溶液/ml 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 … 摇匀，静置15min A … 700 A= A- A(0) — … 700700 样品中磷酸盐浓度(以0 … P计)/(μg/ml) 3.3水中磷的浓度按下式计算: ρ(P)= [10×(A-a)/(b×V) ] ×D 式中: ρ(P)——原水样中氨氮的浓度，mg/L，以P 计; A——试样校正后的吸光值; b——标准曲线的斜率; a——标准曲线的截距; V——所取试样的体积，ml; D——稀释倍数(水样未经稀释时此值为1); 4 注意事项 该方法可用的测定范围非常狭窄，注意稀释样品即可; 注意钼酸盐溶液溶剂是高浓度硫酸溶液，小心腐蚀。