生物化学实验课件-生物化学实验4.pptVIP

实验四 血清蛋白的醋酸纤维素薄膜电泳 生物科学与工程系生物化学教研室 实验目的 1.掌握电泳法分离蛋白质的原理、操作方法。 2.了解电泳法分离蛋白质的临床意义。 生物科学与工程系生物化学教研室 醋酸纤维素薄膜： 醋酸纤维素（二乙酸纤维素）薄膜具有匀一的泡沫状结构，渗透性强，对分子移动无阻力，用它作区带电泳的支持物，具有用样量少，分离清晰，无吸附作用。目前可用于血清蛋白、脂蛋白、糖蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面。 　　醋酸纤维素薄膜经1,4－二氧六环、透明液或液体石蜡处理即透明，因而可得背景为无色的电泳图谱。 生物科学与工程系生物化学教研室 实验原理 电泳:带电质点在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。在一定pH条件下，不同的质点由于等电点不同而带不同性质的电荷，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，即它们的电泳迁移率不同，因此可使它们分离。 影响电泳迁移率的外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象。 影响电泳迁移率的内在因素：质点所带净电荷的量、质点的大小和形状。 醋酸纤维素薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高，对样品无拖尾和吸附现象等优点。 生物科学与工程系生物化学教研室 采用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法称为醋酸纤维素薄膜电泳。醋酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯，将它溶于有机溶剂（如：丙酮、氯仿