土壤中微生物的分离与计数-微生物的实验室培养.docxVIP

PAGE PAGE 1 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数： 　　1．分离菌株的思路 　　(1)自然界中目的菌株的筛选 　　①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 　　②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。 　　(2)实验室中目的菌株的筛选 　　①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度.pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 　　培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物 　　②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。 　　2．统计菌落数目的方法 　　(1)稀释涂布平板法（间接） 　　①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 　　②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 　　(2)利用显微镜直接计数 　　3．分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。