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第六节 各类免疫球蛋白的特性和功能 一、IgG 1.一般特性 (1)单体分子; (2)四个亚类; (3)血清中含量最高(75%Ig); (4)半衰期最长(21~23天); (5)3~5岁达成人水平(8.0~17 mg/ml); (6)可与SPA结合。 2.生物学活性 (1)通过胎盘(新生儿抗感染); (2)激活补体(裂解细胞); (3)调理作用(促进吞噬); (4)介导ADCC(细胞毒作用)。 3.实际意义 (1)抗感染; (2)自身抗体 → 自身免疫病; (3)介导变态反应(Ⅱ、Ⅲ型); (4)封闭抗体 → 肿瘤细胞逃逸; (5)亲合层析法 — IgG纯化; (6)免疫学检测。 二、IgM 1.五聚体,分子量最大(900 kd),又称巨球蛋白; 2.人类发育过程中最早合成的Ig; 3.体液免疫应答最先产生的 Ig — 感染早期免疫; 4.占血清Ig含量的5~10%; 5.半衰期 5天 — 血清中特异性IgM 水平增高提示 有近期感染; 6.激活补体; 7.IgM 不能通过胎盘 →脐带血或新生儿血清中IgM 水平升高表明胎儿有宫内感染; 8.B细胞膜IgM(mIgM) →体液免疫应答; 9.自身抗体 → 自身免疫病 三、IgA 1.两种类型 2.半衰期 6天; 3.占血清Ig含量的5~15%; 4.粘膜局部抗感染免疫; 5.聚合IgA激活补体替代途径。 血清型: IgA1,单体; 分泌型:IgA2,二聚体, 粘膜局部浆细胞合成; 分泌片由粘膜上皮细胞合成; Origin of Secretory Component of sIgA 四、IgD 1.单体分子 2.存在形式 分泌型 — 血清中,功能不清; 膜结合型 — B细胞表面, 3.意义 (1)是B细胞成熟的重要标志; (2)抗原受体; 4.占血清Ig含量的1%; 5.半衰期 3天。 五、IgE 1.单体分子; 2.血清中含量最低(占Ig的0.002%); 3.半衰期 3天; 4.呼吸道和胃肠道浆细胞产生; 5.介导Ⅰ型超敏反应; 6.过敏性疾病和某些寄生虫感染患者血清中特异 性IgE水平增高。 第七节 单克隆抗体和基因工程抗体 一、多克隆抗体(polyclonal antibody) 1.定义 指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。如:免疫血清(含多种特异性抗体)。 2.实际意义 (1)预防、治疗感染性疾病 (2)临床诊断 二、单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb) 1.定义 由单一克隆B细胞杂交瘤产生的,只识别抗 原分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。 2.特点 具有高度均一性。 3.杂交瘤细胞 骨髓瘤细胞 — 无限增殖; 免疫B细胞 — 合成、分泌特异性抗体。 4.杂交瘤技术 HAT培养基:次黄嘌(H), 氨基蝶呤(A)和胸腺嘧 啶核苷(T)。 杂交瘤技术的理论基础 淋巴细胞产生抗体的克隆选择学说,即一种克隆只产生一种抗体 细胞融合技术产生的杂交瘤细胞可以保持双方亲代细胞的特性 利用代谢缺陷补救机理筛选杂交瘤细胞,并克隆化,制备McAb 当两个细胞紧密接触时,细胞膜可能融合在一起。融合细胞含有两个不同的细胞核,称为异核体,产生具有原来两个细胞基因信息的单个核细胞,称为杂交细胞(hybrid cell)。 细胞DNA合成途经 1.替代途径:次黄嘌呤(H) HGPRT 2.主要途径: 氨 基 酸 鸟嘌呤核苷酸 谷 氨 酰 胺 (A-) 尿核苷单磷酸 胸腺嘧啶核苷酸 TK 3.次要途径:胸腺嘧啶核苷(T) HAT选择培养基的原理 HAT选择培养基组分 次黄嘌呤(hypoxanthine,H) 氨甲喋呤(aminopterin,A):叶酸拮抗剂 胸腺嘧啶核苷(thymidine,T) 抗原免
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