第四章 紫外可见分光光法.pptVIP

定义：透光度（或透光率）T 为 因此： T ↗ 、吸收 ↘ 定义： 吸光度 A * 当前29页，共73页，星期日。 第二十九页，共七十三页。 ----朗伯-比尔定律 b ---- 比色池的厚度 c ---- 溶液的浓度  k ---- 吸光系数 在设定条件为： （1）单色、平行光，垂直照射 （2）溶液透明均匀 :浓度均一（C=const.） 溶液的吸光度A只与溶液的浓度和溶液的厚度有关。 朗伯-比尔定律 kbc T A = - = log * 当前30页，共73页，星期日。 第三十页，共七十三页。 物理意义：吸光物质在单位浓度及单位厚度 时的吸光度。 讨论：① k = f（组分性质，温度，溶剂，λ） 当组分性质、温度和溶剂一定，k = f（λ） ② 不同物质在同一波长下k可能不同（选择性吸收）；同一物质在不同波长下k一定不同 吸光系数（Absorptivity and Spectrometry） 吸光系数（ k ） * 当前31页，共73页，星期日。 第三十一页，共七十三页。 ③ k↑，物质对光吸收能力↑, 定量测定灵敏度↑ 定性、定量依据 （1）摩尔吸光系数ε： 在一定λ下，C=1mol.L-1，l = 1cm时的吸光度 （2）百分含量吸光系数 / 比吸光系数 ： 在一定λ下，C=1g/100ml， l =1cm时的吸光度 （3）两者关系 吸光系数（ k）的两种表示方式 * 当前32页，共73页，星期日。 第三十二页，共七十三页。 （二）偏离比尔定律的因素 Elements of deviated Beer Law 按照比尔定律，吸光度（A）与浓度（c）关系应该是过原点的直线。 A c 负偏离 正偏离 偏离Beer定律的主要因素表现为以下两个方面： 光学因素 化学因素 * 当前33页，共73页，星期日。 第三十三页，共七十三页。 1. 光学因素 （1） 非单色光 Beer定律成立的重要前提—入射光为单色光 ΔA1 ΔA2 相同的Δλ，但 ΔA1 Δλ Δλ ΔA2 A λ * 当前34页，共73页，星期日。 第三十四页，共七十三页。 照射物质的光经单色器分光后非真正单色光 其波长宽度由入射狭缝的宽度和棱镜或光栅的分辨率决定 为了保证透过光对检测器的响应，必须保证一定的狭缝宽度 这就使分离出来的光具一定的谱带宽度 非单色光的原因: * 当前35页，共73页，星期日。 第三十五页，共七十三页。 选择较纯单色光（Δλ↓，单色性↑） 选λmax作为测定波长（ΔA↓，灵敏度 S↑且成线性） 结论 * 当前36页，共73页，星期日。 第三十六页，共七十三页。 2.化学因素 Beer定律适用的另一个前提：稀溶液 浓度过高会使C与A关系偏离定律 溶质因解离、缔合以及与溶剂作用偏离定律 Cr2O72-+H2O ? 2H++2CrO42- 例如： * 当前37页，共73页，星期日。 第三十七页，共七十三页。 3. 反射光和散射光的影响 反射光和散色光均是入射光谱带宽度内的光直接对T产生影响。 散射和反射使T↓，A↑，吸收光谱变形 注：一般可用空白对比校正消除 4. 非平行光的影响 使光程↑，A↑，吸收光谱变形 * 当前38页，共73页，星期日。 第三十八页，共七十三页。 第二节 紫外-可见分光度计 紫外-可见分光光度计 * 当前39页，共73页，星期日。 第三十九页，共七十三页。 光源 单色器 吸收池 检测器 信号处理 及显示器 紫外-可见分光光度计的基本组成模块（general process） 一、分光光度计的主要部件 Major Components of spectrometer * 当前40页，共73页，星期日。 第四十页，共七十三页。 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 1.光源 可见光区： 钨灯或卤钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外光区： 氢灯或氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。 * 当前41页，共73页，星期日。 第四十一页，共七十三页。 * 当前42页，共73页，星期日。 第四十二页，共七十三页。 * 当前43页，共73页，星期日。 第四十三页，共七十三页。 2.单色器 将光源发射的连续光谱按波长顺序色散（复合光分解成单色光）并从中分离出一定波长宽度单色光的光学系统。