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第三章植物组织培养详解演示文稿.pptVIP

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A:NAA 0mg/L,芽(少),根(无) B:NAA 0.1mg/L,芽(少),根(无),愈伤组(少量) C:NAA 5.0mg/L,芽(少),根(多),愈伤组织(一定量) A B C 当前62页,共101页,星期日。 第六十二页,共一百零一页。 (2)细胞分裂素 是一类腺嘌呤衍生物。主要有6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、玉米素(ZT)等。其中最常用的是6-苄基氨基嘌呤。 功能: 促进细胞的分裂和分化 诱导芽的分化 促进侧芽的萌发和生长 抑制衰老 当前63页,共101页,星期日。 第六十三页,共一百零一页。 A B A:BA(0mg/L) ,芽(减少),根(增多)愈伤组织(一定量) B:BA(0.1mg/L),芽(适量),根(适量)愈伤组织(一定量) 当前64页,共101页,星期日。 第六十四页,共一百零一页。 控制植物细胞分化 分裂素/生长素的比例是控制芽和根形成的一个重要条件 比例高时——产生芽,比例低时——产生根 当前65页,共101页,星期日。 第六十五页,共一百零一页。 生理作用: 1、诱导茎的细胞伸长,对矮生型植物恢复成高生型特别有效,对根无效。 2、对形成层的细胞分化有影响,往往同生长素有协同作用。IAA/GA比值高有利于木质部的分化,比值低有利于韧皮部的分化。 3、破除种子、鳞茎、块茎休眠,使之提前萌发。 4、对生长素和细胞分裂素的活性有增效作用。 注:不耐热,应采用过滤灭菌加入。 (3)赤霉素(GA3) 当前66页,共101页,星期日。 第六十六页,共一百零一页。 生理作用: 1、抑制蛋白质的合成 2、抵消和抑制生长素、细胞分裂素、GA的作用 3、诱导休眠、促进衰老和脱落 (4)脱落酸(ABA) 当前67页,共101页,星期日。 第六十七页,共一百零一页。 以上四种生长调节物质,前两类用的多,后两类只是补充,对某些植物有利、对某些植物不仅没有利,还有害,实际工作中要具体分析。 生长调节物质在生物体内存在甚微,浓度很低,一般用ppm表示 1ppm=1mg/L 当前68页,共101页,星期日。 第六十八页,共一百零一页。 (1)固化剂 琼脂、琼脂糖(用于原生质体、细胞培养及某些作物的花药培养) 琼脂的用量一般在4-10g/L,所购回的琼脂要先试一下它的凝固力,一般只要能稳定的凝固就不要多加。琼脂以颜色浅、透明度好、洁净的为上品。 (2)悬浮剂 Ficoll(聚蔗糖) 4、固化剂和悬浮剂 当前69页,共101页,星期日。 第六十九页,共一百零一页。 1、根据无机盐的浓度,培养基分为: (1)高无机盐含量培养基 钾盐、铵盐及硝酸盐含量较高,微量元素种类齐全,比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性,养分数量及比例比较合适,广泛用于植物的器官、花药、细胞及原生质体的培养。主要有MS、LS、BL、BM、ER培养基。 (二)培养基的种类 当前70页,共101页,星期日。 第七十页,共一百零一页。 (2)高硝态氮培养基 硝酸钾含量高,氨态氮的含量低,含有较高的VB1。主要适合于十字花科植物、单子叶植物的组织和花药培养。主要有B5、N6、SH培养基。 当前71页,共101页,星期日。 第七十一页,共一百零一页。 先用自来水洗刷至无污物,再用合适的毛刷沾去污剂(粉)洗刷,或浸泡在0.5%的清洗剂中超声清洗(比色皿决不可超声),然后用自来水彻底洗净去污剂,用无离子水洗两次,烘干备用(计量仪器不可烘干)。清洗后器皿内外不可挂有水珠,否则重洗,若重洗后仍挂有水珠,则需用洗液浸泡数小时后(或用去污粉擦洗),重新清洗。 B、使用过的玻璃器皿的清洗 当前30页,共101页,星期日。 第三十页,共一百零一页。 新购置玻璃器皿 1%稀HCl 浸渍12h 洗衣粉洗涤 清水冲洗 烘干备用 已用过的玻璃器皿 当前31页,共101页,星期日。 第三十一页,共一百零一页。 (2)塑料器皿的清洗 新的塑料器皿打开即用 已用过的塑料器皿 2%NaOH浸泡12h 清水冲洗 2%—5%盐酸浸泡30min 清水冲洗 蒸馏水冲洗 晾干备用 当前32页,共101页,星期日。 第三十二页,共一百零一页。 金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤(新的可以用热洗衣粉水洗净),需要清洗时,一般用酒精擦洗,然后火焰干燥。 (3)金属用品洗涤 (4)除菌过滤器洗涤 用清水冲洗后,用

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