细胞培养技术实验报告-显微镜的使用2021204198李泽.docxVIP

西北工业大学生命学院 实验报告 实 验 课 程 细胞培养技术 实 验 名 称 显微镜的使用 姓 名 李泽 学 号 2021204198 班 级 21215-1 专 业 生物学 分 组 成 员 实 验 地 点 生命学院 指 导 教 师 宋朝军 时 间 2021.12.31  实验名称：显微镜的使用 实验目的 认识显微镜的结构和各部分的功能，掌握正确使用显微镜的方法。1、掌握显微镜的构造，熟练使用显微镜进行试验观察。2、能够分析显微镜常见故障的原因，并作适当处理。3.本实验以本人之前所做电转化的毕赤酵母x33做切片为例，观察其细胞形态。 实验原理 1、显微镜的用途 显微镜是一种精密的放大仪器，是研究生物学不可缺少的工具。在学习生物学的过程中，要研究许多细微的结构，必须借助显微镜进行观察。 2、显微镜的构造 光学显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成，其中光学系统主要包括物镜、目镜、遮光器和光源等。 3、显微镜的成像原理 光学显微镜的光学系统两由大部分组成。由目镜和物镜组成成像系统，由反光镜和旋转光样构成照明系统。 实验器材及试剂 显微镜、玻片标本、擦镜纸、物镜测微尺、目镜测微尺 实验步骤 1、低倍镜的使用 (1)取镜和放置:右手握住镜臂,左手托住镜座。把显微镜轻轻地放在实验桌上略偏左、离实验桌边缘5cm为宜。 (2）对光:转动转换器，使低倍物镜正对通光孔(镜端与孔保持2 厘米距离)。转动遮光器，使大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内， 右眼睁开同时用手转动反光镜对向光源。直到目镜里看到白亮的视 野。(3）放置玻片标本:把要观察的装片放在载物台上，有标本的 一面向上瞭使标本正对通光孔的中心，然后用压片夹压住。 (4）调节焦距:下降镜筒，侧目注视物镜头，用手旋转粗准焦螺旋直到物镜头接近装片为止。上升镜筒，左眼注视目镜内，用手旋转粗准焦螺旋使镜筒缓缓上升，直到从目镜内看清物像为止。再轻微来回转动细焦螺旋，使物像更清晰。 2、高倍镜的使用 (1）选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物像调节最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。(2）转动转换器:调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察（防止高倍镜头碰撞玻片），如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。 (3）调节焦距:转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察。调节细准焦螺旋。如果视野的亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节。 实验结果 1、放大倍数:也称放大率。物象的大小对物体大小的比例叫做显微镜的放大倍数。 显微镜总的放大倍数等于目镜的放大倍数和物镜放大倍数的乘积，该放大倍数指的是长度或宽度，而不是面积和体积。 2、视野及镜像亮度:视野是指一次所能观察到的被检标本的范围。视野的大小与放大倍数成反比，即放大倍数越大视野越小，看到的标本范围就越小。镜像亮度是指视野里所看到的像的光亮程度，它与放大倍数成反比，所以在用高倍镜或油镜观察标本时，须移动标本才能看清其他部位 并 使用凹面反光镜、大光圈或增强光源，以改善视野亮度，而使物象明亮清晰。 3、任何需要观察的标本都要先用低倍镜观察，原因是: a.低倍镜视野相对大，便于找目标; b.易调节防止镜头与镜片相撞。 4镜头长度与放大倍数的关系:物镜镜头长度与放大倍数成正比;目镜镜头长度与放大倍数成反比。 5、视野中物象移动与标本移动的关系:如视野中某观察对象位于左下方如何移到中央，应将装片或切片向左下方移动，也就是同向移动。原因是视野中物象移动的方向与装片或切片移动的方向相反。 6、放大倍数的扩大或缩小与视野里细胞数量的变化，例:目镜5X，物镜4X，视野中央有一排细胞共15个，若把物镜换成10X，则细胞数目为6个。因为视野中的细胞数目与放大倍数成反比;若目镜5X，物镜4X，视野中共有50个细胞，再把物镜换成10X，则视野中有8个细胞。因为视野中看到的事物的范围与放大倍数的平方成反比。 结果分析与讨论 从观察结果来看，毕赤酵母属菌种细胞呈球形，椭圆形，拉长型，偶尔成锥形，但不形成尖顶。 讨论 显微镜使用的注意点: 1、禁止单手提拿显微镜和随意拆卸零部件，需按使用说明书或SOP规范操作; 2、低倍下调焦时先上升载物台(或下降镜筒)，再缓慢下降载物台或上升镜筒，使物镜镜头与玻片距离由小到大调焦。一般直接转换成高倍镜后细调焦距; 3、观察标本时两眼应同时睁开，避免使用单只眼观察; 4、调节合适的光圈和电流强度可使成像更清晰; 5、如果使用100×油镜，应在标本上滴一滴香柏油，使镜头底端与该介质接触。观察完后及时用二甲苯擦拭油镜头。注意其它镜头不得接触香柏油。 思考 1、如果在显微镜里看到的像不清楚，应该怎么操作?(1）调节细准焦螺旋逆时针移动，即可获得清晰的物像。(2）如果进