植物离体培养育种.pptVIP

自交不亲和系也可通过组织培养方式大量繁殖，可免蕾期授粉之人工和防止自交衰退。 无性繁殖作物的“无病苗”生产，据此取得重大进展。马铃薯、芋、大蒜、姜、柑橘等茎尖脱毒。 组织培养技术进行种质资源的保存可节省空间，方法简便，繁殖潜力大，避免田间种植的天然杂交，结合低温和超低温的冷冻贮藏，对于保存遗传资源和运输、交换都很方便。 第63页，共86页，编辑于2022年，星期一 组织培养技术的主要阶段 组织和器官培养技术包括实验室设计、建造和设备；培养基的配制；表面灭菌和接种；试管苗出瓶移栽及后期管理。整个过程分三个阶段： 1.无菌培养的建立 主要考虑选择外植体、培养基和环境条件的性质。 2.培养再生植株 利用诱导产生愈伤组织和利用茎尖培养诱生不定新梢等途径。 3.准备将再生植株移栽入土 包括新梢插条的生根、植株的锻炼和使植株由异样状态变为自养状态。 第64页，共86页，编辑于2022年，星期一 是指植物某一器官的全部或部分或器官原基的培养，包括茎段、茎尖、球茎、叶片、子叶、花序、花瓣、子房、花药、花托、果实、种子等。 此处指形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组织和各种器官 组织以及愈伤组织的培养。 器官培养（Organ culture ） 组织培养（Tissue culture） 第65页，共86页，编辑于2022年，星期一 茎尖培养 1、类型 小茎尖： 大茎尖： 材料体积小，不带叶原基的培养难，成苗所需时间长，体积大的则易于成功。 2、作用 无性系快速繁殖； 培养无病毒苗，品种改良； 理论基础研究 10-100?m的茎尖分生组织（脱毒） 几十mm茎尖或更大的芽（快繁） 第66页，共86页，编辑于2022年，星期一 3、建立无菌材料及培养 健康植株上选健壮的枝梢 去叶片用自来水冲洗 再生 培养 MS培养基 75%酒精1分钟 次氯酸钠5-10分钟 0.1%升汞 第67页，共86页，编辑于2022年，星期一 激素配比模式 生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化，应除去或降低生长素的浓度，或者调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。 高 有利于根的形成和愈伤组织的形成; 适中 有利于根芽的分化; 低 有利于芽的形成; 生长素/细胞分裂素 生长调节物质的使用甚微，一般用mg／L表示浓度。在组织培养中生长调节物质的使用浓度，因植物的种类、部位、时期、内源激素等的不同而异，一般生长素浓度的使用为0.05-5mg／L，细胞分裂素0.05—10mg／L。 第31页，共86页，编辑于2022年，星期一 Growth medium is optimised for regeneration of plantlets No sucrose (0%) Sucrose reduced to 1% Sucrose increased to 5% The explant is completely covered with green shoots, and roots are developing on the lower surface Very few shoots have developed on the explant. No roots and no callus. Shoots developed on edges of upper surface, and some root development has occured Shoots have developed over the surface of the explant, along with roots from the lower surface. The result is comparable with the control medium tissue culture in the African Violet 第32页，共86页，编辑于2022年，星期一 No BAP? BAP reduced to 0.1 mg. l-1 No NAA Poor shoot development and no roots. Extensive callus generation Poor shoot development and no roots NAA reduced to 0.1 mg. l-1 More balanced development of roots and shoots. However, undifferentiated callus is developing at the edges of the explant Profuse development