实验二蛋白质的两性反应与等电点测定演示文稿.pptVIP

生物化学与分子生物学实验 实验二蛋白质的两性反应与等电点测定演示文稿 当前1页，共20页，星期日。 了解蛋白质的两性解离性质 掌握测定蛋白质等电点的方法 实验目的 当前2页，共20页，星期日。 P COOH NH2 P COO- NH3+ P COO- NH2 P COOH NH3+ pH=pI +OH- pHpI +H+ +OH- +H+ pHpI 兼性离子 阳离子 阴离子 实验原理 当前3页，共20页，星期日。 在等电点时蛋白质颗粒上的净电荷为零，缺乏同电相斥的因素，蛋白质溶解度最小，最容易析出沉淀 维持蛋白质胶体稳定的因素： 表面电荷、水化膜 当前4页，共20页，星期日。 本实验配制了各种不同pH值的缓冲液，沉淀出现最多的缓冲液pH值即为酪蛋白的等电点 当前5页，共20页，星期日。 实验器材与试剂 大试管、滴管、刻度吸量管 0.5％酪蛋白醋酸钠溶液 0.01％溴甲酚绿指示剂(指示范围: pH3.8-5.4) 0.02M HCL溶液、 0.02M NaOH溶液 0.01M醋酸溶液、0.10M醋酸溶液、 1.00M醋酸溶液 当前6页，共20页，星期日。 蛋白质的两性反应（1） 实验步骤 取一干净试管 酪蛋白液10滴 溴甲酚绿指示剂3滴 观察溶液颜色 并解释现象 当前7页，共20页，星期日。 蛋白质的两性反应（2） 滴加0.02M