HIV检测及临床意义检测.pptxVIP

HIV检测及临床意义中国医科大学附属一院艾滋病确认实验室尚 红精品PPT | 借鉴参考第一页，共四十页。——HIV的发现Montagnie (LAS) 1983. Science 220: 868-871Gallo (HTLV) 1983. Science 220: 865-86 Levy (ARV) 1984. Science 225: 840-842 1986 国际病毒分类委员会： HIV HIV-2 1986西非精品PPT | 借鉴参考第二页，共四十页。中国每年新发现的HIV/AIDS病例数（1985~2002）精品PPT | 借鉴参考第三页，共四十页。HIV感染可通过两种途径检测直接检测病毒或其组成部分检测人体HIV免疫反应——HIV特异性抗体从感染到血清抗体阳转有一段窗口期，平均为1-3个月，有一小部分HIV感染者出现延迟反应精品PPT | 借鉴参考第四页，共四十页。HIV感染后抗原和抗体的变化及其与疾病关系HIV感染人体后出现一过性病毒血症，6-8周后血清抗体阳转，病毒滴度降低，在随后的5-8年无症状带毒期里HIV抗体一直存在，但病毒难查到。进入AIDS期后血浆中病毒再次出现。故诊断HIV感染多数时间用抗体检测诊断，极早期（窗口期）用抗原检测。精品PPT | 借鉴参考第五页，共四十页。HIV抗体诊断 目前临床上实际应用的是测定特异性HIV抗体，包括初筛和确认实验。精品PPT | 借鉴参考第六页，共四十页。一、检测试剂筛查试剂必须是HIV-1/2混合型、经国家药品监督管理局注册批准、批批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。目前常用的筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和其它快速诊断试剂。采供血机构进行血液筛查应采用酶联免疫试剂。自采自供血的单位必须进行HIV抗体检测，在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区可由经过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进行血液筛查。精品PPT | 借鉴参考第七页，共四十页。2、确认试剂必须经国家药品监督管理局注册批准。确认试剂包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验试剂。目前以免疫印迹试剂最为常用。 精品PPT | 借鉴参考第八页，共四十页。ELISA方法： 目前最常用的初筛实验，自1985年首次检测HIV-1抗体的试剂盒供市以来，已从第一代的全病毒抗原间接法发展到第四代的以重组的多肽抗原及抗P24抗体包被的双夹心法，使窗口期缩短了2-3周。精品PPT | 借鉴参考第九页，共四十页。solidphaseconjugatespecificdetection of病毒裂解液HIV-1-IgG抗体IgG 抗体HIV-1 第一代病毒裂解液重组抗原合成肽HIV-1 / -2IgG抗体IgG 抗体HIV-1 / -2 第二代病毒裂解液重组抗原合成肽HIV-1 / -2 / -O病毒裂解液重组抗原合成肽HIV-1 / -2 / -OIgM / IgG 抗体HIV-1 / -2 / -O第三代四代艾滋病酶联免疫试剂比较病毒裂解液重组抗原合成肽HIV-1 / -2 / -Oanti-p24 Ab病毒裂解液重组抗原合成肽HIV-1 / -2 / -Oanti-p24 抗体IgM / IgG 抗体HIV-1 / -2 / -Op24 抗原第四代精品PPT | 借鉴参考第十页，共四十页。HIV antigenIgM abIgG ab4th gen3rd gen1st-2nd gen infectivityDetection limit== == windowClosing the window第一代试剂检测IgG抗体，第三代试剂检测IgG 、IgM抗体,第四代试剂同时检测IgG、 IgM抗体和P24抗原使窗口期缩短。精品PPT | 借鉴参考第十一页，共四十页。检测结果的报告和处理阴性反应出具HIV抗体阴性报告，如果近期有高危行为，如性乱、注射毒品等，或有急性流感样症状等情况，为排除“窗口期”的可能，可以进行HIV-1 P24抗原或HIV核酸检测，或2－3个月以后再做抗体检测。筛查实验呈阳性发现反应，可出具“HIV抗体待复查”的报告，不能出阳性报告。精品PPT | 借鉴参考第十二页，共四十页。样　　本选用初筛试剂初筛检测阳性反应阴性反应原有试剂＋另一种原理初筛试剂重复检测阴性报告均阳性反应一阴一阳均阴性反应送确认阴性报告HIV抗体初筛检测流程图精品PPT | 借鉴参考第十三页，共四十页。快速诊断试剂：采用乳胶凝集、免疫斑点和免疫层析三种原理快速、不需特殊仪器敏感度、特异度低于ELISA，且价格贵适用于血站覆盖不到的边远地区/城市大医院急诊手术前检查快速诊断阳性结果还需经ELISA方法验证精品PPT | 借鉴参考第十四页，共四十页。H