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第十三章 免疫细胞分离与免疫细胞功能检测及应用;内容提要;免疫细胞: 即参与免疫应答的细胞
免疫活性细胞：淋巴细胞
免疫细胞 辅佐作用细胞：单核-巨噬细胞等
参与细胞：N、E、B等;;;
自然沉降
细胞的特性： 密度梯度离心技术
细胞表面标志： 流式细胞仪
免疫磁性微珠分离法;;不同细胞密度不同;;?;二 、淋巴细胞分离; Percoll原液：经聚乙烯吡咯烷酮PVP处理的硅胶颗粒
磷酸盐缓冲液
原理：利用Percoll液经高速离心后形成一个连续密度梯度，将密度不同的细胞分离纯化。
特点：等渗、粘度低、无毒性、不引起细胞聚集
;操作步骤 ;三、 T、B和T细胞亚群的分离 ;; ;;;;;;;;;;第三节 抗原提呈细胞表面标志的检测;;第四节 淋巴细胞功能检测;淋巴细胞;一、T细胞功能的检测;（一）T淋巴细胞增殖试验;2. 淋巴细胞转化的刺激物; 3. 检测方法;（1）形态学检查法;;方法学评价：;（2）3H-TdR掺入法;刺激物 淋巴细胞
MTT
甲赞（蓝黑色颗粒）
二甲基亚砜
溶解
;(二) T细胞分泌功能测定; （三）T细胞介导的细胞毒试验;形态学方法：CTL细胞+肿瘤细胞 计数残留肿瘤细胞
51Cr释放法 ：淋巴细胞（CTL）+51Cr标记的肿瘤细胞
51Cr 释放 测定γ射线;T细胞细胞毒性试验示意图;(四) 体内试验;二、B细胞功能检测;;临床应用与评价;(二)B细胞抗体形成功能的检测 ——酶联免疫斑点法（ELISPOT）;2．应用与方法学评价：;; 第五节 其他免疫细胞功能检测;一、中性粒细胞功能的检测;(一) 趋化功能检测;(二)吞噬和杀菌功能测定;2. 溶菌法;;;(一)吞噬功能检测;(二)巨噬细胞溶酶体酶的测定;激活的巨噬细胞能分泌V, VII, IX, X, 凝血酶原等凝血因子
正常兔血浆+CaCl2
激活的巨噬细胞(试管)
血浆凝固时间 ;反映机体免疫功能状态。
肿瘤、免疫缺陷病等疾病的诊断和疾病预后监测。
组织器官移植后对受者的细胞免疫学功能监测有利于排斥反应的早期发现，以便及时采取有效措施。;思考题
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