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分支杆菌属及检验 ● 考点 结核分枝杆菌 ◆生物学性状；临床意义；微生物学检查 型分支杆菌 ◆概念、种类；鉴别培养方法；检验方法学评价 麻风分支杆菌 【内容讲解】 分枝杆菌属： 一类细长或略带弯曲、为数众多（包括 54 个种）呈分枝状生长的需氧杆菌。 主要特点是细胞壁 脂类，这与其染色性、抵抗力、致病性等密切相关。 耐受酸和抗乙醇，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后，能抵抗 3%盐酸乙醇的脱色作用， 故又称抗酸杆菌。 需氧生长，无鞭毛，无芽胞和荚膜。 一、结核分枝杆菌 引起人和动物结核病的病原菌。 目前已知在我国引起人类结核病的主要有人型和牛型结核分枝杆菌。 （一）生物学特性 1.形态与染色： + G ，细长或略带弯曲的杆菌，在培养基中可呈球状或丝状，陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝 状。 抗酸菌。 既往在组织中曾发现革兰阳性的非抗酸颗粒，接种动物可产生典型的结核病变，后被称为 Much 颗粒。 2.培养特性： ◆专性需氧，在无氧条件下迅速 ，在 5%～10%C0 环境中可刺激其生长。需适当的湿度。本菌生长 2 缓慢，最快的 速度为 18h 一代。 ◆固体培养基：2～6 周才能长出菌落，呈干燥颗粒状，不透明，乳白色或米黄色，表面呈皱纹状，形 似菜花。 ◆液体培养基中生长较快，多为表面生长，形成菌膜，且干燥易碎而沉于管底。 力菌株在液体培 养基中可呈索状生长，无毒株则无此现象。 ◆营养要求较高，必须在血清、卵黄、马铃薯、甘油以及某些无机盐类的特殊培养基上才能生长。 3.生化反应： ◆不发酵糖类，能产生过氧化氢酶，耐热触酶试验、聚山梨酯-80 水解试验和耐热磷酸酶试验均为 ， 脲酶试验和中性红试验均为阳性。 ◆人型结核分枝杆菌：烟酸试验、硝酸盐还原和烟酰胺酶试验均为阳性；牛型结核分枝杆菌均 。 4.抵抗力：对 敏感。 5.变异性：形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异。 毒力变异：卡介苗（BCG）——将 的牛型结核分枝杆菌培养。 于含有甘油、胆汁、马铃薯的培养基中经 13 年传种 230 代，获得减毒菌株，再接种动物，不能致病而 使其获得免疫力。用于预防结核病。 （二）临床意义 1.致病性 ◆不产生内毒素和外毒素，也无荚膜和侵袭性酶。 ◆主要致病物质：脂质 ◆索状因子（破坏细胞，引起肉芽肿） ◆磷脂（形成结核结节） ◆硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合） ◆蜡质 D （引起迟发性过敏反应） ◆主要通过呼吸道、消化道和受损伤的皮肤侵入易感机体，引起多种组织 的结核病，其中以通过 呼吸道引起的肺结核最多见。 ◆肺外 可发生在脑、肾、肠及腹膜。 2.Koch 现象 产生细胞免疫的同时也产生迟发型超敏反应。 结核杆菌迟发型超敏反应和免疫反应是由不同细胞亚群细胞介导的两个 反应可发生在同一 机 体。 3.结核菌素试验 利用Ⅳ型 反应的原理，检测机体是否 过结核杆菌。 本实验对婴幼儿结核病的诊断有意义。 （三）微生物检验 1.标本 根据 部位的不同，可 不同标本。 2.检验方法 （1）涂片检查 1）薄涂片：取痰等标本约0.01ml，涂抹于载玻片上，用萋-尼氏染色（热染法）或 Kinyoun （冷染法） 抗酸染色，镜检。 报告方法： ◆－：全视野（或 100 个视野）未找到抗酸菌； ◆＋：全视野发现 3～9 个； ◆＋＋：全视野发现 10～99 个； ◆＋＋＋：每视野发现 1～9 个； ◆＋＋＋＋：每视野发现 10 个以上（全视野发现 1～2 个