第七章微生物的遗传变异和育种.pptVIP

（1）产量突变株的筛选 第六十三页，共九十三页。 （2）抗药性突变株的筛选 异烟肼是一种抗代谢药物，能阻止敏感菌的生长，而吡哆醇是异 烟肼的结构类似物，当敏感菌能在含异烟肼的培养基上生长时， 能合成更高浓度的吡哆醇，克服了异烟肼的竞争性抑制，所以 用梯度平板法可以筛选到高产吡哆醇的突变株。 涂上诱变后的酵母菌 第六十四页，共九十三页。 基本培养基：仅能满足某微生物的野生型菌株生长所需要的最低 成分的组合培养基。MM 完全培养基：凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半 组合培养基。CM 补充培养基：凡只能满足相应的营养缺陷突变株生长需要的组合 或半组合培养基。SM 野生型：指从自然界分离到的任何微生物在其发生人为营养缺陷 突变前的原始菌株。遗传型表示法是[A+B +] 营养缺陷型：野生型菌株经诱变处理后，由于发生了丧失某酶合 成能力的突变，因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生 长。 A营养缺陷型用[A-B +]表示，B营养缺陷型用[A+B -]表示 原养型：一般指营养缺陷型突变经回复突变或重组后产生的菌株，其营养要求在表型上与野生型相同。 遗传型均用[A+B +]表示 （3）营养缺陷型突变株的筛选 第六十五页，共九十三页。 营养缺陷型突变株的筛选方法（见书P222） 诱变 检出营养缺陷型 淘汰野生型 鉴定营养缺陷型 富集培养 （抗生素法） 青霉素——细菌 制霉菌素——真菌 （菌丝过滤法）——丝状真菌和放线菌 夹层培养法 限量补充培养法 逐个检出法 影印平板法 生长谱法 第六十六页，共九十三页。 a 夹层培养法 （3）营养缺陷型的筛选方法 基本培养基——野生型 完全培养基——营养缺陷型 上、下两层基本培养基的作用是使菌落夹在中间，以免细菌移动或被完全培养基冲散。 第六十七页，共九十三页。 B 限量补充培养法 c 逐个检出法 d 影印平板法 满足营养缺陷型 满足野生型 第六十八页，共九十三页。 基因重组：两个独立基因组内的 遗传基因，通过一定的途径转移 到一起，称为基因重组。 一、原核生物的基因重组 （一）转化 受体菌直接吸收了供体菌的DNA 片段而获得后者部分遗传性状的 现象，称为转化作用。 通过转化方式而形成的杂种后代，称转化子。 第三节 基因重组和杂交育种 第六十九页，共九十三页。 两个菌株或菌株间能否发生转化，取决于以下两个因子： 1、建立了感受态的受体细胞 感受态：受体细胞最易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。 2、外源游离DNA分子（转化因子） 转染：用提纯的病毒核酸（DNA或RNA）去感染其宿主细胞或其原生质体， 可增殖出一群正常病毒后代的现象。 第七十页，共九十三页。 转化与转染的区别 转化：在自然情况下，某些细菌溶解以后释放的DNA被其他细菌吸收而发生转化。 现在我们说到转化，一般都是指实验室内从细菌里面纯化的DNA分子直接导入遗传性状相异的细菌，比如质粒转化，我们用的是纯化的质粒DNA本身，没有任何媒介帮助。从这个概念的内涵来说，只要DNA进入细菌，就完成了转化过程。 转染： 对于真核生物，转染就是原核生物中转化的同义词；原核生物中，偶尔也用到转染这个词，当细菌的转化过程中吸收的外源DNA是病毒DNA时就应该称此过程为转染 第七十一页，共九十三页。 （二）转导（transduction） 通过缺陷噬菌体为媒介，把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象 。 细菌转导的类型： 普遍转导 局限转导 完全普遍转导 流产普遍转导 低频转导 高频转导 第七十二页，共九十三页。 1、普遍转导 通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何小片段DNA进行误包，而将其遗传性状传递给受体菌的现象。 （1）完全普遍转导（定义见书P226） （2）流产普遍转导（定义见书P227） 第七十三页，共九十三页。 2、局限转导 指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并与后者的基因组整合、重组，形成转导子的现象。 特点： （1）只局限于传递供体菌核染色体上的个别特定基因； （2）该特定基因由部分缺陷的温和噬菌体携带； （3）缺陷噬菌体的形成方式是由于它在脱离宿主核染色体过程中 发生低频率的误切或由于双重溶源菌的裂解而形成 （4）局限噬菌体的产生要通过UV等因素对溶源菌的诱导引起裂 解后才产生。 第七十四页，共九十三页。 （1）低频转导 指通过一般溶源菌释放的噬菌体所进行的转导，因其只能形成极少数转导子，故称低频转导。 （2）高频转导 双重溶源菌：同时感染有正常噬菌体和缺陷噬菌体的受体菌。 在