DMEM培养基配制方法.doc

v1.0可编写可改正 自行配制DMEM的方法及说明书 这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是同样的）： TOPREPARE1*LIQUID 1.Measrueout5%lessdistilledwaterthandesiredtotalvolumeofmediumusing amixingcontainerthatisasclosetothefinalvolumeaspossible. 2.Addpowderedmediumto15to30℃(roomtemperature)waterwithgentle stirring.(Donotheatwater) Rinseoutinsideofpackagetoremovealltracesofpowder. Add3.7gofNaHCO3perliterofmedium. 5.Dilutetoadesiredvolumewithwater.Stiruntildissolved.(Donotover-mix) AdjustpHofmediumtobelowdesiredfinalworkingpH*useofINNaOHorINHClisrecommended.(Addslowlywithstirring)AfterpHhasbeenadjustedkeepcontainercloseduntilmediumisfiltered. 7.Sterilizeimmediatelybymembranefiltration.(Positivepressurerecommended) *pHunitewillusuallyrisefiltration. 此外，在李玲、李雪峰编著的《细胞生物学实验》中配制方法如下： 1 制备新鲜三蒸水或Millipore 超纯水。 2 称取所需量的干粉培养基， 加入约终体积一半的三蒸水中；若配制一个包装的培养液， 在将整个包装的干粉倒入三蒸水后， 需用水洗包装袋内面 2次，倒入培养液中，以保证所有 干粉都溶解成培养液。磁力搅拌或人工搅拌使之完全溶解。 3根据包装袋上的要求补加所需量的碳酸氢钠；根据实验需要，添HEPES（5-20mmol/L）、 谷氨酰胺和其他特殊物质。 加水定容到终体积。 5 必要时用1mol/L盐酸和1mol/L氢氧化钠调节pH。 6 用无菌滤膜过滤除菌，分装于无菌血清瓶中，4℃冰箱保留。 1 v1.0可编写可改正 配制好的培养液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL链霉素，并根据需要加入血清 （5%-20%）。 2