合肥万物生物冰冻切片 JC-1 实验报告.pdf免费

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冰冻切片JC-1实验报告 1.实验器材及试剂 1.1实验器材 名称 厂家 型号 冰冻切片机 Thermo Cryotome E 载玻片 Wanwu 物 盖玻片 江苏世泰实验器材有限公司 微波炉 格兰仕微波炉电器有限公司 P70D20TL-P4 脱色摇床 北京市六一仪器厂 WD-9405A 万 涡旋混合器 天悦电子 TYXH-II 移液枪 Dragon KE0003087/KA0056573 肥 组化笔 Wanwu WG1066-1 冰箱 青岛海尔股份有限公司 BCD-192TGN 合 倒置荧光显微镜 日本尼康 NIKON ECLIPSE TI-SR 成像系统 日本尼康 NIKON DS-U3 物 1.2 主要实验试剂 万 试剂 厂家 货号 稀释比 OCT包埋剂 Wanwu G6059-110ML PBS缓冲液 Wanwu 碧云 G0002 肥 JC-1检测试剂盒 天 C2006 1:500 DAPI Wanwu G1012 抗荧光淬灭封片剂 Wanwu 合G1401 2. 冰冻切片免疫荧光实验步骤 2.1 画圈: 冰冻切片在室温下复温,控干水分,组化笔画圈。 2.2 JC-1孵育 :在画好圈的组织上加入稀释好的JC-1,37°温箱孵育20min。 2.3 染DAPI:玻片置于PBS (PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。滴加DAPI 网址: 细胞网址: 地址:合肥市蜀山区长江西路248号11层 电话: 400-1016-218 邮箱:2028438226@ 染液,室温避光孵育10分钟。 2.2 封片:玻片置于PBS (PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干 后用抗荧光淬灭封片剂封片。 2.3 镜检拍照:切片于荧光显微镜下观察并采集图像。(紫外激发波长330-380nm,发射波 长420nm;FITC绿光激发波长465-495nm,发射波长515-555nm;CY3红光激发波长510-560,

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