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冰冻切片JC-1实验报告
1.实验器材及试剂
1.1实验器材
名称 厂家 型号
冰冻切片机 Thermo Cryotome E
载玻片 Wanwu 物
盖玻片 江苏世泰实验器材有限公司
微波炉 格兰仕微波炉电器有限公司 P70D20TL-P4
脱色摇床 北京市六一仪器厂 WD-9405A
万
涡旋混合器 天悦电子 TYXH-II
移液枪 Dragon KE0003087/KA0056573
肥
组化笔 Wanwu WG1066-1
冰箱 青岛海尔股份有限公司 BCD-192TGN
合
倒置荧光显微镜 日本尼康 NIKON ECLIPSE TI-SR
成像系统 日本尼康 NIKON DS-U3
物
1.2 主要实验试剂 万
试剂 厂家 货号 稀释比
OCT包埋剂 Wanwu G6059-110ML
PBS缓冲液 Wanwu 碧云 G0002
肥
JC-1检测试剂盒 天 C2006 1:500
DAPI Wanwu G1012
抗荧光淬灭封片剂 Wanwu 合G1401
2. 冰冻切片免疫荧光实验步骤
2.1 画圈: 冰冻切片在室温下复温,控干水分,组化笔画圈。
2.2 JC-1孵育 :在画好圈的组织上加入稀释好的JC-1,37°温箱孵育20min。
2.3 染DAPI:玻片置于PBS (PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。滴加DAPI
网址:
细胞网址:
地址:合肥市蜀山区长江西路248号11层
电话: 400-1016-218
邮箱:2028438226@
染液,室温避光孵育10分钟。
2.2 封片:玻片置于PBS (PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干
后用抗荧光淬灭封片剂封片。
2.3 镜检拍照:切片于荧光显微镜下观察并采集图像。(紫外激发波长330-380nm,发射波
长420nm;FITC绿光激发波长465-495nm,发射波长515-555nm;CY3红光激发波长510-560,
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