生物选修三第一讲.pptx

锁定高考;第1讲　基 因 工 程;考点一 基因工程的基本工具;2. 基因工程的操作工具 (1)“分子手术刀”—— (限制酶)。 ①来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。 ②作用：识别特定的 ，并切开特定部位的两个核苷酸之间的 。 ③特性：一种限制酶只能识别 的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。 ④结果：产生 或平末端。;种类;(3)“分子运输车”——载体。 ①种类： 、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 ;;2. 限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关酶的分析比较 ;3. 载体的作用及作为载体的条件 ;基因工程中基本工具的8个易错点 (1)限制酶是一类酶，而不是一种酶。 (2)限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。 (3)在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。 (4)将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。 ;基因工程中基本工具的8个易错点;;(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用 两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过 酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于 态的大肠杆菌。 (2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加 ，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中 。 (3)若BamH Ⅰ酶切的DNA末端与Bcl Ⅰ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 ，对于该部位，这两种酶 (填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。 (4)若用Sau3A Ⅰ切图1质粒最多可能获得 种大小不同的DNA片段。 ;解析　(1)选择的限制酶应在目的基因两端且在质粒中存在识别位点，故可以用来切割的限制酶为BclⅠ、HindⅢ、BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ，但由于BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ可能使质粒中的启动子丢失或破坏抗性基因，所以应选用Bcl Ⅰ、Hind Ⅲ两种限制酶切割。酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA连接酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入感受态的大肠杆菌??，使其增殖。(2)根据质粒上的抗性基因，为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加四环素。平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物需要与单链两端相应序列互补结合，故所用引物组成是图2中的引物甲和引物丙。; (3)若BamH Ⅰ酶切的DNA末端和Bcl Ⅰ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为GGATCA,CCTAGT)　)，由于两种酶均不能识别该部位的碱基对序列，故两种酶都不能切开该部位。(4)根据题表中BclⅠ、BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ的识别序列及切割位点可知，Sau3A Ⅰ可识别并切割BamH Ⅰ和Bcl Ⅰ的位点，故Sau3A Ⅰ在质粒上有三个酶切位点，完全酶切可得到记为A、B、C的三种片段，若部分位点被切开，可得到AB、AC、BC、ABC四种片段，所以用Sau3A Ⅰ切割质粒后最多可能获得7种大小不同的DNA片段。;考点二　基因工程的基本操作程序;2. 基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、 等。 ①启动子 a. 位置：位于 。 b. 作用：是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因 ，最终获得所需要的蛋白质。 ②终止子 a. 位置：位于基因的尾端。 b. 作用：使 在所需要的地方停止下来。;(2)构建目的 ①使目的基因在 中稳定存在，并且可以遗传给下一代。 ②使 能够表达和发挥作用。 ;稳定和表达;4. 目的基因的检测与鉴定 ;5. 基因工程的应用 (1)植物基因工程：主要用于提高农作物的____________，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 (2)动物基因工程：主要应用于动物品种改良、建立生物反应器、______等方面。 (3)基因工程药物：来源于转基因的_________。 (4)基因治疗：把___________导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能。 ;;②从基因文库中获取目的基因的方法可根据基因的核苷酸序列、基因功能、基因在染色体上的位置、基因