合肥万物生物滴片,涂片制作实验报告.pdf免费

合肥万物生物滴片,涂片制作实验报告.pdf

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滴片,涂片制作实验报告 一、实验器材及试剂 1、实验器材 名称 厂家 型号 移液枪 大龙仪器 7010101009 吸头 Wanwu G82010 烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230 离心机 DRAGONLAB D3024R 载玻片 Wanwu 物 正置光学显微镜 日本尼康 NIKON ECLIPSE E100 2、主要实验试剂 万 试剂名称 厂家 货号 固定液 肥Wanwu G1101 二、实验步骤 1、涂片的制作: 合 血涂片制作: 1.1.取新鲜血液选用石蜡用的干净的防脱玻片,用移液枪吸取10ul 的血液,滴加在玻片的 物 一侧;再取一片辅助玻片 (也可选用盖玻片),用其宽边靠近血液,会发现血液会沿着接 触边缘向两边晕开,当两边都要到达边缘时,以45度的角度用手轻轻的稳健且匀速的把 辅助玻片推向另一侧进行涂片。 万 1.2 自然晾干后,用甲醇固定15min,水洗晾干。 2.细胞悬液滴片制作: 肥 2.1取细胞悬液,2800rpm 4℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀的细胞量加入2ml 甲醇固定。若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000rpm,4℃离心10min。 2.2 取用甲醇重悬的细胞悬液,2800rpm 25℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀加入 合 PBS:①若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000rpm,25℃离心10min,依然无沉淀时,留取 底部约0.2ml 的液体,再加入0.5ml 的PBS混匀后用移液枪吸取200ul,滴于提前用组化 笔画好的小圆圈中 (3cmX2cm 的椭圆);②若细胞沉淀量很少,绿豆大小时,弃上清, 留取底部沉淀,加入0.5mlPBS,用移液枪吹打混匀后,吸取200ul,涂于提前用组化笔画 好的小圆圈中 (3cmX2cm 的椭圆);③若细胞沉淀量很多,黄豆大小或更大时,弃上清, 留取底部沉淀,加入2mlPBS, 用移液枪吹打混匀后,吸取150ul,涂于提前用组化笔画好 网址: 细胞网址: 地址:合肥市蜀山区长江西路248号11层 电话:400-1016-218 邮箱:2028438226@ 的大圆圈中 (最大长边约5cm,最大短边约2cm 的椭圆),在显微镜下观察细胞量的多 少,若还是过厚,再用PBS对倍稀释该细胞悬液,直至在显微镜下观察到细胞量涂布均 匀。 2.3用枪将细胞悬液铺满整个圆圈,涂片放置自然晾干。 物 万 肥 合

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