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滴片,涂片制作实验报告
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
移液枪 大龙仪器 7010101009
吸头 Wanwu G82010
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
离心机 DRAGONLAB D3024R
载玻片 Wanwu
物
正置光学显微镜 日本尼康 NIKON ECLIPSE E100
2、主要实验试剂 万
试剂名称 厂家 货号
固定液 肥Wanwu G1101
二、实验步骤
1、涂片的制作:
合
血涂片制作:
1.1.取新鲜血液选用石蜡用的干净的防脱玻片,用移液枪吸取10ul 的血液,滴加在玻片的
物
一侧;再取一片辅助玻片 (也可选用盖玻片),用其宽边靠近血液,会发现血液会沿着接
触边缘向两边晕开,当两边都要到达边缘时,以45度的角度用手轻轻的稳健且匀速的把
辅助玻片推向另一侧进行涂片。 万
1.2 自然晾干后,用甲醇固定15min,水洗晾干。
2.细胞悬液滴片制作: 肥
2.1取细胞悬液,2800rpm 4℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀的细胞量加入2ml
甲醇固定。若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000rpm,4℃离心10min。
2.2 取用甲醇重悬的细胞悬液,2800rpm 25℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀加入
合
PBS:①若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000rpm,25℃离心10min,依然无沉淀时,留取
底部约0.2ml 的液体,再加入0.5ml 的PBS混匀后用移液枪吸取200ul,滴于提前用组化
笔画好的小圆圈中 (3cmX2cm 的椭圆);②若细胞沉淀量很少,绿豆大小时,弃上清,
留取底部沉淀,加入0.5mlPBS,用移液枪吹打混匀后,吸取200ul,涂于提前用组化笔画
好的小圆圈中 (3cmX2cm 的椭圆);③若细胞沉淀量很多,黄豆大小或更大时,弃上清,
留取底部沉淀,加入2mlPBS, 用移液枪吹打混匀后,吸取150ul,涂于提前用组化笔画好
网址:
细胞网址:
地址:合肥市蜀山区长江西路248号11层
电话:400-1016-218
邮箱:2028438226@
的大圆圈中 (最大长边约5cm,最大短边约2cm 的椭圆),在显微镜下观察细胞量的多
少,若还是过厚,再用PBS对倍稀释该细胞悬液,直至在显微镜下观察到细胞量涂布均
匀。
2.3用枪将细胞悬液铺满整个圆圈,涂片放置自然晾干。
物
万
肥
合
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