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阿利新蓝茜素红双染实验报告
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
解剖镊
解剖剪
照相机 佳能 EOS70D
培养皿 物
标本瓶 Wanwu G6008-40ML
2、主要实验试剂 万
试剂名称 厂家 货号
阿利新蓝 SIGMA A5268
茜素红 肥西亚
冰醋酸 国药集团化学试剂有限公司
乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
甘油 国药集团化学试剂有限公司
合
KOH 国药集团化学试剂有限公司
丙酮 国药集团化学试剂有限公司
物
二、试剂配制
1、阿利新蓝8GS:0.3g 阿利新蓝粉剂以70%的乙醇为溶剂定容至100ml。
万
2、茜素红:0.1g 茜素红粉剂以95%的乙醇为溶剂定容至100ml。
3、阿利新蓝-茜素红染液:将0.3%阿利新蓝:0.1%茜素红:冰醋酸:70%乙醇按照1:1:1:
肥
17 的比例充分混合。
4、透明液:20%甘油:1%KOH 按1:4 混合。
合
5、保存液:50%甘油。
6、1%KOH:1gKOH 粉剂溶于100ml 纯水中完全溶解。
三、实验步骤
1、样品处理:取材后先用95%的乙醇固定5 天或更长时间的,固定时间不要超过3个月。
网址:
细胞网址:
地址:合肥市蜀山区长江西路248号11层
电话: 400-1016-218
邮箱:2028438226@
2、骨架的分离与固定:丙酮处理2-7 天 (一般孕13-16 天直接处理2 天,孕16 天以上的用
两只尖头镊子剥下胎鼠的皮及内脏后处理7 天),丙酮完全浸没组织,处理时间依组织大小
可适当延长。
3、染色:对于孕期13-16 天的胎鼠:用镊子将样品取出,入装有30ml 阿利新蓝-茜素红染
液的样本瓶中染色4h 后,即可入 1%KOH 透明1天 (具体以骨架透明为主),对于孕期 16
天以上的胎鼠:用镊子将样品取出,入装有40ml 阿利新蓝-茜素红染液的样本瓶中染色2-3
天后观察爪子及舌头处是否为砖红色,边染边观察整体是否偏蓝,若开始上蓝色就取出纯水
洗,即可入 1%KOH 透明2 天 (具体以骨架透明为主)。
4、透明及拍照:取出样品,入20%甘油中透明1周,直至骨架和肌肉都清晰为主,最后转
入50%甘油中拍照。 物
5、保存:50%甘油中保存样品。
四、结果判读 万
1、小鼠骨架清晰透明,骨架呈现紫
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