合肥万物生物阿利新蓝茜素红双染实验报告.pdf免费

合肥万物生物阿利新蓝茜素红双染实验报告.pdf

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阿利新蓝茜素红双染实验报告 一、实验器材及试剂 1、实验器材 名称 厂家 型号 解剖镊 解剖剪 照相机 佳能 EOS70D 培养皿 物 标本瓶 Wanwu G6008-40ML 2、主要实验试剂 万 试剂名称 厂家 货号 阿利新蓝 SIGMA A5268 茜素红 肥西亚 冰醋酸 国药集团化学试剂有限公司 乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683 甘油 国药集团化学试剂有限公司 合 KOH 国药集团化学试剂有限公司 丙酮 国药集团化学试剂有限公司 物 二、试剂配制 1、阿利新蓝8GS:0.3g 阿利新蓝粉剂以70%的乙醇为溶剂定容至100ml。 万 2、茜素红:0.1g 茜素红粉剂以95%的乙醇为溶剂定容至100ml。 3、阿利新蓝-茜素红染液:将0.3%阿利新蓝:0.1%茜素红:冰醋酸:70%乙醇按照1:1:1: 肥 17 的比例充分混合。 4、透明液:20%甘油:1%KOH 按1:4 混合。 合 5、保存液:50%甘油。 6、1%KOH:1gKOH 粉剂溶于100ml 纯水中完全溶解。 三、实验步骤 1、样品处理:取材后先用95%的乙醇固定5 天或更长时间的,固定时间不要超过3个月。 网址: 细胞网址: 地址:合肥市蜀山区长江西路248号11层 电话: 400-1016-218 邮箱:2028438226@ 2、骨架的分离与固定:丙酮处理2-7 天 (一般孕13-16 天直接处理2 天,孕16 天以上的用 两只尖头镊子剥下胎鼠的皮及内脏后处理7 天),丙酮完全浸没组织,处理时间依组织大小 可适当延长。 3、染色:对于孕期13-16 天的胎鼠:用镊子将样品取出,入装有30ml 阿利新蓝-茜素红染 液的样本瓶中染色4h 后,即可入 1%KOH 透明1天 (具体以骨架透明为主),对于孕期 16 天以上的胎鼠:用镊子将样品取出,入装有40ml 阿利新蓝-茜素红染液的样本瓶中染色2-3 天后观察爪子及舌头处是否为砖红色,边染边观察整体是否偏蓝,若开始上蓝色就取出纯水 洗,即可入 1%KOH 透明2 天 (具体以骨架透明为主)。 4、透明及拍照:取出样品,入20%甘油中透明1周,直至骨架和肌肉都清晰为主,最后转 入50%甘油中拍照。 物 5、保存:50%甘油中保存样品。 四、结果判读 万 1、小鼠骨架清晰透明,骨架呈现紫

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