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- 2022-05-26 发布于湖南
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7.检测 7.1 定性分析(同一性试验)在相同的状态下(相同类型的TLC/HPTLC板、相同的溶剂体系组成、相同的组份点样体积和其它TLC设备系统),样品成份的Rf值、颜色、与专用的或特殊基因衍生化试剂的反应和参考物或标准物在同一TLC/HPTLC板同时层析所得的结果相符时,未知物就可认为是存在而被鉴别出来。分析的结果可以采用照片,照片复制品,影像记录(如:CAMAG 薄层色谱数码成像系统)或TLC扫描仪方法记录下来。为增加测试物与参照物同一性的可信度,采用TLC扫描仪实时记录其紫外光和可见光图谱并进行比较。 7.2 定量分析(仪器:CAMAG scanner-3;具体操作请参考操作手册或教学软件) 定量分析采用光密度扫描法来评价。用winCATS 软件控制薄层色谱扫描仪以及进行扫描结果的数据处理,计算出各成分的峰高和峰面积及其平均值和离散系数(CV)。通过单水平或多水平校准计算出结果。最后以报告形式将所有扫描参数、原始资料及图像结果保存及打印。扫描狭缝宽度根据被测成份斑点的大小来调整(1)点状点样得到TLC中各成份,扫描其全宽度;(2)条带状点样,通常可以扫描其色谱带同心部分的50 - 70%。物质的扫描波长可以通过光谱扫描来决定。TLC/HPTLC板空白部位的漫射反射光用光电倍增器(PM)来收集并定其值为10% 。扫描吸光物质时,其吸收随着物质的量而增加。
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