细胞生物学思考题.docxVIP

第1章 绪论 基本概念 1.细胞生物学(cell biology)：是研究和揭示细胞基本生命活动规律的学科，它从显微、亚显微及分子水平上研究细胞结构与功能，细胞增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡，以及细胞信号转导，细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等重大生命过程 2.细胞学说：①细胞是有机体，，一切动植物都是由细胞发育而来，并有细胞核细胞产物构成。②每个细胞作为一个相对独立的单位，既有自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命有所助益。③新的细胞可以通过已存在的细胞繁殖产生。 第3章 细胞生物学研究方法 基本概念 1.免疫荧光技术：将免疫学方法（抗原抗体特异结合）与荧光标记技术结合起来，研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。利用荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。 2.密度梯度离心：通过离心力的作用使样品中不同组分以不同的沉降率在密度梯度溶液中沉降，形成不同的沉降带，从而达到分离细胞组分的目的。 3.光脱色恢复技术（FPR）：使用亲水性或亲脂性的荧光分子，如荧光素、绿色荧光蛋白与蛋白或脂质耦联，用于检测所标记分子在活体细胞表面或细胞内部的运动及其迁移速率。 4.原代细胞：是指从机体取出后立即培养的细胞，一般指培养的第2代至传10代以内的细胞。 5.接触抑制：动物细胞培养过程中，贴壁生长的正常二倍体细胞表面相互接触时分裂随之停止，这种现象称为细胞的接触抑制。 6.细胞融合：通过培养和诱导，两个或多个细胞融合为一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合或细胞杂交。 1.如何从细胞匀浆中纯化线粒体 （1）机械破碎或酶处理使细胞膜和细胞间的连接断裂，把线粒体和其他各种细胞器从组织细胞中游离出来。 （2）采用差速离心的方法，低速 到 高速逐渐沉降，得到各种组分，包括粗提线粒体。（ 先细胞核 再线粒体） （3）密度梯度离心 多用蔗糖进行纯化，得到相对较纯的线粒体。 2.模式生物在细胞生物学的研究中具有重要作用，列举3种模式生物分别在细胞生物学重要问题研究中的贡献。 （一）大肠杆菌：原核细胞，培养方便，生长快，基因结构简单，突变株的诱变，分离和鉴定容易，转基因技术成熟，进行基因定位简便易行 （二）酵母：单细胞真核生物的代表：芽殖酵母和裂殖酵母，生长迅速并且易于遗传操作 常用于蛋白质相互作用、细胞周期、基因表达调控、膜泡运输、细胞分化和衰老等 （三）线虫：遗传背景清楚、生命周期只有3天，成体只有959个细胞，通体透明，便于胚胎发育中细胞分裂、分化以及细胞的死亡的研究 （四）果蝇：基因组序列已测定，与人类基因有很高的同源性，在遗传分析、染色体特性研究、胚胎发育的基因调控和细胞分化机制的研究、神经退行性疾病和学习、认知等领域的研究发挥重要的作用 （五）斑马鱼：小型脊椎动物。许多基因与人类的基因存在对应关系 3 个月性成熟、产卵多、胚胎体外发育，利于研究胚胎发育过程中细胞行为 3.要研究一种蛋白的生物学功能，如在细胞中的定位，请说出两种不同的研究方法及其大致的流程。 ①免疫荧光标记：将免疫学方法与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出从而可对抗原进行细胞定位。实验步骤主要包括荧光抗体的制备、标本的处理。免疫染色和观察记录等过程。标本处理有多种方法，组织切片、冷冻切片、整装细胞都可应用，其宗旨是为保持被测蛋白质的抗原性；免疫染色就是抗原抗体反应的过程。 ②免疫电镜技术：将免疫学方法与电镜技术相结合，抗体偶联电子致密物。步骤：样品制备（固定、包埋、超薄切片制备、免疫标记和染色）。 第4章 细胞质膜 细胞质膜的基本特征与功能 细胞质膜的基本特征与功能 细胞质膜的结构模型与基本成分 细胞质膜 结构模型 结构特点 膜脂 膜蛋白 膜的流动性 膜的不对称性 细胞质膜的基本功能 细胞质膜相关的膜骨架 流动镶嵌模型、脂筏模型等 两性磷脂分子在水相中形成脂双层结构 蛋白质分子以不同的方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面 成分：甘油磷脂、鞘脂、固醇 运动方式：侧向运动、自旋运动、尾部的摆动、翻转运动 脂质体：可作为药物或DNA载体 三种类型：外在膜蛋白、内在膜蛋白、脂锚定膜蛋白 内在膜蛋白与膜脂有三种结合方式 膜脂的流动性：取决于脂分子本身的性质和温度 膜蛋白的流动性：小鼠-人细胞融合、成斑成帽现象、荧光漂白恢复技术 膜脂不对称性：不同膜脂在脂双层两个半膜内分布不同 膜蛋白不对称性：每种膜蛋白分子在质膜上都具有明确的方向性 糖脂或糖蛋白：糖残基分布在生物膜的非胞质半膜一侧 红细胞的生物学特性 红细胞质膜蛋白及膜骨架 提供相对稳定的内环境 具选择性的物质运输 提供细胞识别位点 为多种酶提供结合位点 介导细胞与细胞、细胞与胞外基质之间的连接 参与形成细胞表面