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创建精蛋白重组人胰岛素注射液无菌检查方法 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：创建精蛋白重组人胰岛素注射液无菌检查方法 1 1、仪器和材料 2 2、方法与结果 3 3、讨论 6 文2：显示器故障的检查方法 8 一、故障原因分析 8 （一）工作时间过长 8 （二）显示器工作环境温度过高 9 （三）工作电压不稳定 9 二、计算机显示器故障及其检查方法 9 （一）显示图像偏移 9 （二）显示器偏色 10 （三）安装显示器驱动程序后某些程序不能运行 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 创建精蛋白重组人胰岛素注射液无菌检查方法 文1：创建精蛋白重组人胰岛素注射液无菌检查方法 胰岛素治疗是目前公认的最有效的糖尿病核心疗法[1]。根据胰岛素来源，临床使用的胰岛素制剂包括动物胰岛素、合成或半合成胰岛素及胰岛素类似物三大类；根据作用时间，又分为超短效、短效、中效、长效、超长效和预混胰岛素。精蛋白重组人胰岛素注射液是一种中效胰岛素制剂，其中带负电荷的胰岛素与带正电荷的硫酸鱼精蛋白结合形成棒状晶型的白色沉淀，降低胰岛素在体液中的溶解度，达到缓慢释放的目的[2]。将短效制剂和中效制剂按一定比例混合得到预混胰岛素，其作用时间介于两者之间[3]，如低预混胰岛素（门冬胰岛素30注射液等）和中预混胰岛素（门冬胰岛素50注射液等） 药品无菌检查是药品质量中对微生物限量的最高要求，任何微生物的存活对于用药者而言都可能是致命的存在[4]。供试品特性、供试品处理方法、检测环境和培养体系等均影响无菌产品中微生物的检出，科学的无菌检查方法是保障无菌检查结果可靠性及准确性的重要因素。精蛋白重组人胰岛素注射液为混悬液，采用适宜稀释剂将结晶体完全溶解后方可采用薄膜过滤法进行无菌检查。《中华人民共和国药典》（《中国药典》）2015年版二部精蛋白重组人胰岛素注射液[5]无菌检查规定，加1%抗坏血酸溶液100 mL振摇使溶液澄清后，采用薄膜过滤法进行无菌检查。USP35低精蛋白人胰岛素混悬液的无菌检查方法[6]与之相似，但在USP36进行修订，使用“经验证过的适宜溶剂”作为稀释剂[7]，并一直沿用至USP42[8]。USP论坛曾提出使用肝素钠注射液替换抗坏血酸作为胰岛素混悬液无菌检查用稀释剂[9]，但国内尚无此方面文献报道。故本文考察肝素钠溶液对胰岛素混悬液的溶解状况，比较研究1%抗坏血酸溶液和肝素钠溶液对微生物的影响，建立了精蛋白重组人胰岛素注射液的无菌检查方法，对其他胰岛素混悬液的无菌检查有较好的参考作用。 1、仪器和材料 培养基、试剂与试药 胰酪大豆胨琼脂培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基（北京陆桥技术有限责任公司）；蛋白胨（北京三药科技开发公司）；抗坏血酸（上海麦克林生化科技有限公司）；肝素钠注射液（规格：2 mL∶万单位，天津生物化学制药有限公司）；精蛋白重组人胰岛素注射液（规格：300 IU*3mL，批号：GR7E359，HR7G903，HR7N537）（诺和诺德（中国）制药有限公司） 试验菌种 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa)[CMCC(B)10104]、金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003]、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis)[CMCC(B)63501]、大肠埃希菌（Escherichiacoli)[CMCC(B)44102]、生孢梭菌（Clostridiun sporogenes)[CMCC(B)64941]、白色念株菌（Candidaalbica)[CMCC(F)98001]、黑曲霉（Aspergillus niger)[CMCC(F)98003]均购自中国食品药品检定研究院。 仪器、耗材 泵（Whatman）；恒温培养箱（BINDER公司）；1 mL及10 mL移液器移液器（Thermo）公司；集菌仪（MILLIPORE公司）；p H计（METTLER TOLEDO公司）；数显恒温水浴箱（常州国华电器有限公司）；硝酸纤维滤膜（法国赛多利斯有限公司）；全封闭无菌试验过滤培养器（浙江泰林生物技术股份有限公司）；GENbag厌氧产气袋及厌氧发生指示条（梅里埃诊断产品上海有限公司） 2、方法与结果 肝素钠溶液体积的确定 取肝素钠注射液用无菌水稀释成500 IU·mL-1溶液。取新鲜配制的500 IU·m L-1肝素钠溶液3、5和7 mL分别置试剂瓶中，分别加入10支精蛋白重组人胰岛素注射液，震荡混匀，观察溶解情况。结果显示，500 IU·m L-1肝素钠溶液5 mL能充分溶解