酶的定向进化.pptxVIP

会计学 1 酶的定向进化 2022-5-31 酶分子改造技术的分类 一是基于序列的合理化设计方案，如化学修饰，定点突变等；二是利用基因的可操作性，通过模拟自然界的演化进程进行非合理化设计方案。 酶分子的定向进化属于蛋白质的非合理设计方式。 第1页/共11页 2022-5-31 1993年,美国科学家Arnold F H首先提出酶分子的定向进化的概念,并用于天然酶的改造或构建新的非天然酶. 酶分子定向进化的历史 1994年Stemmer等人首次利用基因从组技术获得了理想的突变体，开拓了酶分子定向进化的方法。 第2页/共11页 2022-5-31 2006年, Ryota等为基因片段重组这一思想增添 了新的内容,开发出一新的突变文库构建方法———随机片段交换法( RAndomInsertional - deletionalStrand Exchangemutagenesis, RAISE) 。 该方法主要由三个步 骤组成,即基因破碎; 添加随机短序列; 重新组装。 第3页/共11页 2022-5-31 酶定向进化的基本过程 主要包括：随机突变、构建突变基因文库、定向选择。 基本过程的图示： 酶基因 随机突变 构建突变基因文库 筛选 正突变基因 反复进行 进化酶 负突变基因 第4页/共11页 2022-5-31 目前酶定向进化的主要策略 1.易错PCR 技术 是指利用TaqDNA聚合