消毒后餐饮具的微生物检验技术.ppt

消毒后食饮具的微生物检验技术; 饮食业食饮具消毒是控制肠道传染病发生和流行的重要环节之一，也是防止胃肠道传染病传播的重要措施。现行国家标准为GB 14934-94食（饮）具消毒卫生标准 ，该标准适用于宾馆、饭店、餐厅、食堂等饮食企业的食（饮）具，也适用于个体摊点的食（饮）具。;一、餐饮具消毒指标(感官指标、理化指标、细菌指标) 1 感官指标1.1　物理消毒（包括蒸汽、煮沸等热消毒）：食（饮）具必须表面光洁、无油渍、无水渍、无异味。1.2　化学消毒：食（饮）具表面必须无泡沫、无洗消剂的味道，无不溶性附着物。　;2　理化指标　　　 采用化学消毒的食（饮）具，必须用洁净水清洗，消除残留的药物。用含氯洗消剂消毒的食（饮）具表面残留量，应符合表1的要求。  表1 理化指标;3 细菌指标　 采用物理或化学消毒的食（饮）具均必须达到表2的要求。（发酵法与纸片法任何一法的检验结果均可作为判定依据。 ） 表2 细菌指标;二　采样与检验方法1　发酵法检测大肠菌群1.1　采样方法　　食（饮）具抽检碗、盘、口杯，将2.0cm×2.5cm（5cm2?）灭菌滤纸片紧贴内面各10张（总面积50 cm2、）、碟、匙、酒杯以每5件为1份，每件内面紧贴灭菌滤纸片各2张（总面积50 cm2/份）,经1min，按序取置入50 mL灭菌盐水试管中，充分振荡后，制成原液。　　筷：取每双的下段12 cm处约50 cm2（l2cm×2cm×2cm），置入50 mL 灭菌盐水试管中，充分振荡20次，制成原液。; ;1.2　检验方法 1.2.1 初发酵试验 选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1mL，36℃±1 ℃培养24 h±2 h，观察倒管内是否有气泡产生，24 h±2 h产气者进行复发酵试验，如未产气则继续培养至48 h±2 h，产气者进行复发酵试验。未产气者为大肠菌群阴性。 ;1.2.2 复发酵试验 用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36 ℃±1℃培养48 h±2 h，观察产气情况。产气者，计为??肠菌群阳性管。;1.2.3 大肠菌群最可能数（MPN）的报告 按1.2.2 确证的大肠菌群LST阳性管数，检索MPN表（见GB4789.3-2010附录B），报告每g（mL）样品中大肠菌群的MPN值。;1.2.4 MPN表(GB4789.3-2010附录B) ;2　纸片法检测大肠菌群　　食（饮）具消毒采用专用的大肠菌群快速检验纸片。2.1　采样方法　　随机抽取消毒后准备使用的各类食具（碗、盘、杯等），取样量可根据大、中、小不同饮食行业,每次采样6～10件,每件贴纸片两张,每张纸片面积25cm2（5cm×5cm）用无菌生理盐水湿润大肠菌群检测用纸片后，立即贴于食具内侧表面，30s后取下，置于无菌塑料袋内。　　　筷子以5只为一件样品，用毛细吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后，立即将筷子进口端（约5cm）抹拭纸片，每件样品抹拭两张，放入无菌塑料袋内。;2.2　检验方法　　将已采样的纸片置37℃培养16～18 h，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。; 致病菌检验 GB 4789_4-2010 沙门氏菌检验.mht GB 4789_11-2003溶血性链球菌检验.mht GB 4789_10-2010金黄色葡萄球菌检验.mht GB-T 4789-5-2003 志贺氏菌检验.mht;3.1.1 沙门氏菌检验程序见图 1。 ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ;3.2.2 操作步骤(1 )前增菌无菌操作将样品转至 500 mL 锥形瓶中，于 36 ℃±1 ℃培养 8 h～ 18h。(2) 增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取 1 mL，转种于 10 mL TTB 内，于 42 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。同时，另取 1 mL，转种于 10 mL SC 内，于 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。(3)分离培养分别用接种环取增菌液 1 环，划线接种于一个 BS 琼脂平板和一个 XLD 琼脂平板（或 HE 琼脂 平板或沙门氏菌属显色培养基平板）。于 36 ℃±1 ℃