凝聚胺交叉配血标准操作规程.pdfVIP

凝聚胺交叉配血标准操作规程 一、目的： 为标准交叉配血实验的技术操作，保证临床输血平安有效，特制定本规程。 二、适用范围 适用于输血科进行交叉配血实验 三、职责 输血科技术人员负责交叉配血实验。 四、测定原理： 红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正 电荷，能够中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。假设是未被抗体致 敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，实验结果 为阴性；但如果是红细胞被相应的抗体所致敏，那么会被凝聚胺凝集，凝块就可不能散开，实验结 果为阳性。 五、试剂及材料 (一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所) 成份：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液； 保留条件：2~8℃贮存2年，试剂盒打开利用后可置于室温 (二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等 六、标本要求： (一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为）静脉血 2-3ml （注意查对病人信息）, 在 3000r/mi 条件下离心5分钟备用。 (二)标本保留：血液样本必需密封，2~8℃保留7天。 (三)用于交叉配血必需是2~8℃保留3天之内的标本。 七、操作程序： (一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。 (二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。 (三)取干净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或 “主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。 （四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。 次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。 各加低离子介质溶液 ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静 置15s。 (五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。 (六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，那么必 需重做。 (七) 最后加入重悬液 2 滴，轻轻转动试管混合，并同时观看结果，必要时 在显微镜下观看结果。 八、结果判定： (一)阴性：60秒内凝块散开，代表由聚凝胺溶液引发的非特异性凝集，配血 结果相合。 (二)阳性：60 秒内凝块不散开，代表红细胞抗原抗体结合的特异性反映，配血结果不相合。 (三)如反映可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观看。 九、注意事项： (一)假设病人血浆（血清）含肝素，须多加双倍量的聚凝胺溶液以中和肝素。 (二)冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引发的凝集反映，阻碍结 果判定。 (三)加入血清量应严格依照操作方式，多加血清会提高离子强度，降低致敏 成效。 (四)抗原抗体比例适当。