生物制药工艺课程新增实验.docxVIP

14.1 酵母细胞的破碎及破碎率的测定 14.1.1 实验目的 1.掌握超声波细胞破碎的原理和操作 2.学习细胞破碎率的评价方法 14.1.2 实验原理 频率超过15~20kHz 的超声波,在较高的输入功率下(100~250W)可破碎细胞。 本实验采用 JY92-2D 超声波细胞破碎机(宁波新芝科器研究所制造),其工作原理 是:JY92-2D 超声波细胞破碎机由超声波发生器和换能器两个部分组成。超声波 发生器(电源)是将 220V、50Hz 的单相电通过变频器件变为 20~25Hz、约 600V 的交变电能,并以适当的阻抗与功率匹配来推动换能器工作,做纵向机械振动,振 动波通过浸人在样品中的钛合金变幅杆对待破碎的各类细胞产生空穴化效应,从 而达到破碎细胞的目的。 14.1.3 仪器、材料及试剂 (一)仪器 1.超声波细胞破碎机 2.电子显微镜 (二)材料及试剂 1.酒精灯 2.载玻片。 3.血球计数板。 4.接种针 5.酵母细胞悬浮液:0.2g/mL 的啤酒酵母溶于50mmol/L 乙酸钠-乙酸缓冲溶 液(pH 为 4.7)。 6.土豆培养基:①土豆(去皮切块)200g;②琼脂 20g;③蔗糖 20g:④蒸馏水 1000mL;⑤pH 为 6.5.制备过程:选优质土豆去皮切块,加水煮沸 30min,然后用纱布 过滤,再加糖及琼脂,溶化后补充加水至 1000mL,分装,115℃灭菌,2