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一、实验目的
1.观察叶绿体的自发荧光
2.观察叶绿体和细胞核的次生荧光
3.熟悉荧光显微镜的使用方法;二、实验原理; 自发荧光:
生物体内的物质受激发光照射后直接发出荧光,如叶绿素的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。
次生荧光:
有的生物材料本身不发荧光,但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光, 如叶绿体和细胞核吸附吖啶橙后分别发桔红色和绿色荧光。;吖啶橙:
可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。;;三、实验材料与用品
实验材料:
烟草、蚕豆、大葱叶片
试剂:
0.01%吖啶橙
0.9%氯化钠溶液;;四、实验方法:;2、叶绿体自发荧光观察
叶片徒手切片,表皮条,提取的叶绿体
置荧光显微镜下
用紫外激发光照射标本
观察记录细胞中叶绿体的形态、数目和分布状况。
; 3、叶绿体、细胞核次生荧光观察
叶片徒手切片,表皮条,提取的叶绿体
滴加0.01%吖啶橙,加盖玻片
染色1分钟
置荧光显微镜下观察,用紫外激发光照射标本,记录细胞中叶绿体和细胞核的形态、数目和分布状况。
;五、注意事项:
1.吖啶橙为有毒物质,使用时注意不要涂到皮肤、实验台等其它器皿上。用过的载玻片放到指定地点统一处理。
2.使用荧光显微镜时要正确操作。
3.吖啶橙易分解,染色时要致黑暗处,观察时动作要快。;五、实验报告及作业
加入吖啶橙染色后,叶绿体和细胞核各发出什么颜色的荧光?为什么?
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